4.2.1.1.1. Dénombrement des coliformes totaux et coliformes
thérmotolérants :
Cette méthode conduit à un dénombrement présomptif des coliformes totaux et des coliformes
fécaux.
Filtrer sur deux membranes différentes, dans les conditions précisées antérieurement, deux
prises d'essai de l'eau à analyser soigneusement homogénéisée par agitation. Placer chacune
des deux membranes sur une boîte de gélose lactosée au TTC et Tergitol. Mettre ces boîtes à
incuber durant 24 heures l'une à 37 °C, l'autre à 44 (± 0,5 °C). (figure 06)
La lecture des boîtes se fait comme suit :
- Après 24 heures d’incubation, les coliformes apparaissent sous forme de petites
colonies jaunes ou orangées, lisses, légèrement bombées.
- Etant donné le caractère sélectif de la gélose TTC ; ne pousseront théoriquement que
les coliformes.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser
La flore bactérienne associée est généralement beaucoup moins abondante dans la boîte
incubée à 44 °C.
Il est à noter que les prises d’essais pour les coliformes totaux et les coliformes fécaux étaient
de 50 et 100ml respectivement. Et que des dilutions au 1/4 ont été effectuées pour les stations
où on a enregistré des colonies confluentes indénombrables (milieux très chargés).
4.2.1.1.2. Dénombrement des streptocoques fécaux :
Filtrer 100 ml de l’échantillon. Puis placer la membrane sur le milieu de Slanetz et Bartley.
Incuber pendant 24 heures à 37 °C (figure 06). Les streptocoques fécaux apparaissent sous
forme de petites colonies rouges, marron ou roses, lisses, légèrement bombées. (Institut
Pasteur d’Algerie, 2002)
Pour plus de précision, transférer la membrane sur le milieu BEA. La lecture se fait après un
quart d’ heures, et ne retenir que les colonies entourées d’un halo noir.
34
thérmotolérants :
Cette méthode conduit à un dénombrement présomptif des coliformes totaux et des coliformes
fécaux.
Filtrer sur deux membranes différentes, dans les conditions précisées antérieurement, deux
prises d'essai de l'eau à analyser soigneusement homogénéisée par agitation. Placer chacune
des deux membranes sur une boîte de gélose lactosée au TTC et Tergitol. Mettre ces boîtes à
incuber durant 24 heures l'une à 37 °C, l'autre à 44 (± 0,5 °C). (figure 06)
La lecture des boîtes se fait comme suit :
- Après 24 heures d’incubation, les coliformes apparaissent sous forme de petites
colonies jaunes ou orangées, lisses, légèrement bombées.
- Etant donné le caractère sélectif de la gélose TTC ; ne pousseront théoriquement que
les coliformes.
- Le nombre de colonies trouvées sera exprimé dans 100 ml d’eau à analyser
La flore bactérienne associée est généralement beaucoup moins abondante dans la boîte
incubée à 44 °C.
Il est à noter que les prises d’essais pour les coliformes totaux et les coliformes fécaux étaient
de 50 et 100ml respectivement. Et que des dilutions au 1/4 ont été effectuées pour les stations
où on a enregistré des colonies confluentes indénombrables (milieux très chargés).
4.2.1.1.2. Dénombrement des streptocoques fécaux :
Filtrer 100 ml de l’échantillon. Puis placer la membrane sur le milieu de Slanetz et Bartley.
Incuber pendant 24 heures à 37 °C (figure 06). Les streptocoques fécaux apparaissent sous
forme de petites colonies rouges, marron ou roses, lisses, légèrement bombées. (Institut
Pasteur d’Algerie, 2002)
Pour plus de précision, transférer la membrane sur le milieu BEA. La lecture se fait après un
quart d’ heures, et ne retenir que les colonies entourées d’un halo noir.
34