Chapitre II : MATERIEL ET METHODES
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Le protocole expérimental
2.4.2
Le protocole décrit est celui adopté par (Charlou et Joanny, 1983) et (l’A.I.E.A, 2001).
Cependant, certaines étapes sont modifiées en fonction des réactifs et du matériel disponible
au laboratoire.
Minéralisation à blanc
2.4.2.1
Avant l’utilisation des godets, on procède à une minéralisation à blanc. Un volume de 4 ml
d’acide nitrique (HNO 3 ) à 69% est mis dans chaque godet à téflon puis ce dernier est fermé
hermétiquement. Après une nuit à température ambiante, les godets sont mis sur une plaque
chauffante à 120°C pendant 2h 30min. Après refroidissement des échantillons, la soupape de
sécurité est ouverte doucement, les godets sont rincé à l’eau bi-distillée et séché à l’étuve.
Minéralisation de l’échantillon biologique
2.4.2.2
Selon le protocole décrit par (l’A.I.E.A, 2001), la minéralisation a lieu sous hotte aspirante
dans un godet en téflon. Un poids de 0.5g de chair ou 0.25 g de radula lyophilisé de patelle est
pesé. Un volume de 5ml d’acide nitrique (HNO 3 ) à 69% est rajouté puis les godets sont
fermés hermétiquement avec des pinces.
Les échantillons sont laissés à température ambiante pendant une nuit, puis mis sur plaque
chauffante à 120°C pendant 2h30min (Figure 18, annexe 2).
Les échantillons sont laissés à refroidir avant d’ouvrir la soupape de sécurité doucement.
Après ouverture des godets, les minéralisâtes sont transférés dans des tubes coniques en
polypropylène de 50 ml, et les godets sont rincés à l’eau bi-distillée au moins 3 fois en
récupérant les rinçages toujours dans les tubes en polypropylène. Le volume est ajusté
jusqu’au trait de jauge de 50 ml avec l’eau bi-distillée Un blanc est inséré avec chaque série
d’échantillons biologiques. On met 5ml d’acide nitrique (HNO 3 ) concentré à 69% dans un
godet en téflon.
Les séries sont conservés dans un réfrigérateur à 4°C jusqu’au moment du dosage pour éviter
toute perte et contamination (A.I.E.A, 2001).
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