Chapitre 2
Matériels & Méthodes
77
Les colonies peuvent aussi apparaitre en :
 Petites colonies vertes claires avec virage du milieu vers l'orange (réduction
du saccharose) ;
 Colonies jaune brunes: Vibrio cholerae ;
 Colonies jaunes translucides de grande taille ;
 Colonies incolore au centre vert : Vibrio parahaemolyticus ;
 Colonies orange saumon ;
 Colonies marron de grande taille ;
 Colonies orange bombées, d'autres sont transparentes ;
Les figures ci-après schématisent les techniques utilisées pour la recherche
et l’identification des vibrions dans l’eau de mer.
2.5.2.7.8.2. Salmonelles
Les salmonelles sont des bactéries entériques en forme de bâtonnets, anaérobies
facultatives, à Gram négatif, mobiles pour la plupart avec des flagelles péritriches,
de 0,7-1,5 × 2,0-2,5 µm, qui produisent du sulfure d’hydrogène, leur classification est
complexe et basée surtout sur les critères biochimiques et surtout sérologiques.
Les salmonelles sont présentes dans l’intestin de l’homme et des animaux et présentent
des variations importantes de pathogénicité en fonction de la nature de l’hôte. Plusieurs
sérotypes de Salmonella sont largement distribués dans la nature et associés aux matières
fécales des animaux. On retrouve surtout les salmonelles dans les produits d’origine animale,
y compris les produits de la mer, les produits consommés crus et l’eau polluée.
Si les conditions de développement sont défavorables, elles sont aptes à se multiplier
aux basses températures (5 à 10°C), la croissance est très lente mais peut être significative.
A- Principe :
La recherche de Salmonelles s’effectue classiquement selon un schéma comportant trois
étapes : Le pré-enrichissement, l’enrichissement, et l’isolement. Dans le cas où les résultats
sont positifs on passe à l’identification biochimique.
On procède, dans notre étude, à deux enrichissements successifs sur milieu SFB
additionné de disques SFB. L’isolement est effectué sur gélose SS (gélosé SalmonellesShigelles). L’identification est faite sur galerie API 20 E après test biochimiques : coloration
de Gram, test de la catalase, test de l’oxydase.
L'identification des bactéries isolées est basée sur l'attaque des trois sucres suivants:
salicine, lactose, et saccharose et la production d'H2S à partir de thiosulfate. Sachant
que les Salmonelles n'attaquent aucun de ces sucres.
La présence de colonies bleue-vertes à centre noir ou vert présume la présence
de Salmonelles. Les colonies vertes sont: Shigella ou Providencia, Pseudomonas. Les colonies
saumon : Escherichia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Serratia. Les colonies saumon
à centre noir : Proteus, Citrobacter.