Chapitre II : Méthode d’identification
43
Figure 10 : Principe de la PCRmultiplex
(https://www.abmgood.com/marketing/knowledge_base/polymerase_chain_variation_sy
stem.php)
2. 2.4 PCR en temps réel :
La technologie de PCR en temps réel devient de plus en plus populaire dans
différents secteurs d’activité. Cette technologie est basée sur la détection et la quantification
d’un émetteur fluorescent pendant le processus d’amplification et l’augmentation du signal
d’émission fluorescente est directement proportionnelle à la quantité d’amplicons produits
durant la réaction PCR (Poitras,et al., 2002).
Il existe deux principes généraux pour la détection quantitative des amplicons :
1. les agents se liant à l’ADN double brin (ex. SYBR Green I), Leur émission fluorescente
augmente lorsque qu’ils sont liés à l’ADN double brin. Pour être utilisés dans une réaction
de PCR en temps réel, ces agents doivent rencontrer deux exigences : augmenter en
fluorescence lorsque lié à l’ADN double brin et ne pas inhiber la réaction de PCR
(Poitras,et al., 2002).