Transvaser l’échantillon et son premier solvant d’extraction dans l’ampoule à décanter
(2L) et ajouter 50ml d’Hexane, agiter manuellement pendant 20 minutes pour faciliter le
contact entre le solvant d’extraction et les hydrocarbures sans oublier d’ouvrir le bouchon de
temps à autre afin de baisser la pression, laisser décanter pendant 15 minutes, à l’aide d’une
éprouvette graduée, récupérer la phase aqueuse qui se situe au dessous à cause de sa densité
qui est plus élevée que celle de la phase organique (phase supérieure), noter le volume d’eau
extrait, recueillir la phase organique à l’aide d’un ballon, ajouter 2g de sulfate de sodium
Na2SO4 à l’extrait afin d’éliminer les traces d’eaux, Puis fermer le avec un bouchon en verre
et conserver l’échantillon à 4°C.
II.6.2 Concentration
La concentration de l’extrait d’eau de mer est réalisée dans le but d’éliminer le solvant
d’extraction à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000-efficient Heidolph). Pour
éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point d’ébullition bas, on concentre nos
échantillons jusqu’à un volume de 10 ml. Pour minimiser cette perte, on maintient le bain
marie à une température de 40°C et la pression d’aspiration est maintenue à 1,5 bars. Il subit
ensuite une deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 2 ml.
II.6.3 Purification et fractionnement
Dans cette étape, on utilise une burette de 50ml de contenance, de 0,1ml de diamètre interne
et munie d’un robinet en téflon, elle est remplie selon la méthode humide successivement
par :
- La laine de verre ;
- 15ml de l’Hexane, puis en le laisse couler (pour le conditionnement de la burette) ;
- 5g du gel de silice mélangé avec l’Hexane puis laisser décanter en récupérant
l’Hexane sans laisser la colonne séchée ;
- 5g d’’alumine mélangé avec l’Hexane puis laisser décanter en récupérant l’Hexane
sans laisser la colonne séchée ;
- Ajouter 0,5g de Na2SO4 en tête de la colonne pour l’absorption des gouttelettes d’eau
s’ils existent encore.
a) La fraction aliphatique
- Verser l’échantillon après leur agitation avec un agitateur mécanique ;
- Ajouter 20 ml d’Hexane puis récupérer la fraction 1 qui présente la fraction
aliphatique dans un tube à essaie conditionné au paravent ;
- Fermer le avec le téflon puis conserver au frais.
b) La fraction aromatique
- Ajouter 20 ml de mélange binaire du solvant Hexane-dichlorométhane dans des
proportions égales (70/30) ;
- Récupérer la fraction 2 qui représente les aromatiques ;
- Conserver au frais.
Matériel et méthodes
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(2L) et ajouter 50ml d’Hexane, agiter manuellement pendant 20 minutes pour faciliter le
contact entre le solvant d’extraction et les hydrocarbures sans oublier d’ouvrir le bouchon de
temps à autre afin de baisser la pression, laisser décanter pendant 15 minutes, à l’aide d’une
éprouvette graduée, récupérer la phase aqueuse qui se situe au dessous à cause de sa densité
qui est plus élevée que celle de la phase organique (phase supérieure), noter le volume d’eau
extrait, recueillir la phase organique à l’aide d’un ballon, ajouter 2g de sulfate de sodium
Na2SO4 à l’extrait afin d’éliminer les traces d’eaux, Puis fermer le avec un bouchon en verre
et conserver l’échantillon à 4°C.
II.6.2 Concentration
La concentration de l’extrait d’eau de mer est réalisée dans le but d’éliminer le solvant
d’extraction à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000-efficient Heidolph). Pour
éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point d’ébullition bas, on concentre nos
échantillons jusqu’à un volume de 10 ml. Pour minimiser cette perte, on maintient le bain
marie à une température de 40°C et la pression d’aspiration est maintenue à 1,5 bars. Il subit
ensuite une deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 2 ml.
II.6.3 Purification et fractionnement
Dans cette étape, on utilise une burette de 50ml de contenance, de 0,1ml de diamètre interne
et munie d’un robinet en téflon, elle est remplie selon la méthode humide successivement
par :
- La laine de verre ;
- 15ml de l’Hexane, puis en le laisse couler (pour le conditionnement de la burette) ;
- 5g du gel de silice mélangé avec l’Hexane puis laisser décanter en récupérant
l’Hexane sans laisser la colonne séchée ;
- 5g d’’alumine mélangé avec l’Hexane puis laisser décanter en récupérant l’Hexane
sans laisser la colonne séchée ;
- Ajouter 0,5g de Na2SO4 en tête de la colonne pour l’absorption des gouttelettes d’eau
s’ils existent encore.
a) La fraction aliphatique
- Verser l’échantillon après leur agitation avec un agitateur mécanique ;
- Ajouter 20 ml d’Hexane puis récupérer la fraction 1 qui présente la fraction
aliphatique dans un tube à essaie conditionné au paravent ;
- Fermer le avec le téflon puis conserver au frais.
b) La fraction aromatique
- Ajouter 20 ml de mélange binaire du solvant Hexane-dichlorométhane dans des
proportions égales (70/30) ;
- Récupérer la fraction 2 qui représente les aromatiques ;
- Conserver au frais.
Matériel et méthodes
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