Chapitre 3: matériel et méthodes
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La radiation ultraviolette de même que la lumière visible possède suffisamment d’énergie
pour transférer des électrons vers des orbitales anti-liantes créant ainsi un état électronique
excité.
 L’émission
Cette phase représente le retour de la molécule à un état électronique de moindre énergie
ou la désactivation est relativement stable. Il fait intervenir un grand nombre de transitions
produisant chacune l’émission d’une radiation dans toutes les directions. L’ensemble des
transitions constitue le spectre d’émission du rayonnement de fluorescence.
 Préparation des standards
La standardisation de l’appareil nécessite un hydrocarbure de comparaison ou étalon de
référence, celui préconisé dans cette méthode est le chrysène.
Le mode opératoire pour la préparation des standards est le suivant :
 Préparation de la solution mère : faire diluer 1 mg de chrysène dans 10 ml d’hexane
 Préparation des solutions standards à partir de la solution mère présentées dans le
tableau ci-dessous.
 Mettre les fioles des solutions standards dans un bac à ultrason afin de dissoudre les
chrysène dans l’hexane.
Tableau III.10: Concentrations des standards préparés à partir de la solution
mère
Figure III.5: Droite d’étalonnage des standards en équivalent du chrysène.
Standard
[C]μg/ml
S1
0.2
S2
0.4
S3
0.6
S4
0.8
S5
1