Chapitre II : Matériel et méthode.
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II.4.7 Effet du pH
Afin de tester la tolérance des souches aux différents pH, des solutions stériles du milieu
ONR7 à différents pH ont été préparés. Chaque souche a été ensemencé dans du milieu
minéral (ONR7) à pH 4,4 7,6 et 10,5contenant 1% de source de carbone.
II.4.7.1 Mode opératoire
- Préparer les milieux de culture a différentes valeurs de pH (en ajustant le pH avec du
HCl ou NaOH
- Remplir les tubes à essai avec 5ml de chaque milieu ;
- Prélever une colonie de la souche bactérienne de la gélose ;
- Ensemencer la colonie dans le tube contenant le milieu ;
- Ajouter 50µl d’hydrocarbure (soit pétrole soit alcane) ;
- Agiter le mélange à l’aide d’un vortex ;
- Incuber à 30 °C avec agitation pendant une semaine.
II.4.8 Effet de la salinité
Le test de biodégradation a été réalisé sur milieu minéral de ONR7 liquide à différentes
concentrations de NaCl (0%, 2.2%, 5%, 10% ,20%), Additionné 1% de la source de carbone
(soit pétrole brut soit alcane) (BIRECHE et BERREGUI ,2014).
II.4.8.1 Mode opératoire
- Préparer les milieux de culture a différentes concentrations de NaCl ;
- Remplir les tubes à essai avec 5ml de chaque milieu ;
- Prélever une colonie de la souche bactérienne de la gélose ;
- Ensemencer la colonie dans le tube remplis par le milieu ;
- Ajouter 50µl d’hydrocarbure (soit pétrole soit alcane) ;
- Agiter le mélange à l’aide d’un vortex ;
- Incuber à 30 °C avec agitation pendant une semaine.