Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
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Après une incubation à 44°C, la confirmation du caractère coliforme fécal est
démontrée par la fermentation du lactose avec production de gaz et la mise en évidence
de la production de l’indole à 44°C après ajout du réactif de Kovacs.
4.3 Recherche et dénombrement des Enterococcus (Streptocoques fécaux)
Deux tests sont nécessaires pour le dénombrement des streptocoques fécaux. Le premier est
présomptif et est réalisé sur le milieu Slanetz et Bartley tandis que le deuxième est confirmatif et
est réalisé sur gélose BEA (gélose Bile Esculine Azide). Ce dernier contient une plus forte
concentration d’azide de sodium ce qui ne laisse se développer que les streptocoques fécaux
(figure II.5).
 Mode opératoire
- filtrer un volume de 100ml d'échantillon ou des dilutions;
- déposer la membrane filtrante quadrillée sur le milieu de Slanetz et Bartley ;
- incuber à l’étuve à 37°C pendant 24 à 48h ;
- Une fois ce temps écoulé, déposer la membrane sur le milieu BEA pendant 20 minutes ce
qui permet de dénombrer les colonies noires de streptocoques fécaux ;
- Le nombre de colonies trouvées est exprimé en Unité Formant Colonie dans 100 ml
d’eau analysée (UFC/100ml).