Chapitre III : MATERIELS ET METHODES
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de lumière (spectrophotométrie) ou fluorescence (Spectrofluorimètre)(AMINOT et
KEROUEL, 2004).
2.4.3 Mode opératoire
2.4.3.1 Filtration
• Agiter la bouteille de prélèvement pour récupérer toute les particules ;
• Verser l’échantillon dans une éprouvette de 1000 ml, afin de mesurer et noter les
volumes filtrés ;
• Placer une membrane sur le support et y déposer 1à 2ml de suspension de carbonate de
magnésium;
• Appliquer le vide et filtrer l’échantillon à une pression supérieur à ½ bar pour éviter
l’éclatement des cellules ;
• Rincer les parois de support à l’eau de mer fraichement filtrée pour rassembler les
particules de l’échantillon accroché sur le filtre ;
• Plier chaque filtre en quatre (la face chargé à l’intérieur) à l’aide d’une pince et
conserver dans le papier aluminium étiqueté au congélateur.
Remarque : Il faut bien rincer les postes de filtration à l’eau distillé avant la filtration
de chaque échantillon.
2.4.3.2 Extraction des pigments recueillis sur les filtres :
Elle est réalisée dans 10ml d’acétone à 90%. Le filtre et l’extrait pigmentaire ne doivent
jamais rester à la lumière, à cet effet, il est bon d’envelopper les tubes dans du papier
aluminium.
• Prendre le filtre plié et le placer dans un tube contenant 10ml d’acétone a 90% ;
• Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette en verre à embout coupant ;
• Boucher et agiter pour disposer les fibres ;
• Laisser 20h au réfrigérateur.
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de lumière (spectrophotométrie) ou fluorescence (Spectrofluorimètre)(AMINOT et
KEROUEL, 2004).
2.4.3 Mode opératoire
2.4.3.1 Filtration
• Agiter la bouteille de prélèvement pour récupérer toute les particules ;
• Verser l’échantillon dans une éprouvette de 1000 ml, afin de mesurer et noter les
volumes filtrés ;
• Placer une membrane sur le support et y déposer 1à 2ml de suspension de carbonate de
magnésium;
• Appliquer le vide et filtrer l’échantillon à une pression supérieur à ½ bar pour éviter
l’éclatement des cellules ;
• Rincer les parois de support à l’eau de mer fraichement filtrée pour rassembler les
particules de l’échantillon accroché sur le filtre ;
• Plier chaque filtre en quatre (la face chargé à l’intérieur) à l’aide d’une pince et
conserver dans le papier aluminium étiqueté au congélateur.
Remarque : Il faut bien rincer les postes de filtration à l’eau distillé avant la filtration
de chaque échantillon.
2.4.3.2 Extraction des pigments recueillis sur les filtres :
Elle est réalisée dans 10ml d’acétone à 90%. Le filtre et l’extrait pigmentaire ne doivent
jamais rester à la lumière, à cet effet, il est bon d’envelopper les tubes dans du papier
aluminium.
• Prendre le filtre plié et le placer dans un tube contenant 10ml d’acétone a 90% ;
• Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette en verre à embout coupant ;
• Boucher et agiter pour disposer les fibres ;
• Laisser 20h au réfrigérateur.
