Chapitre II : Matériel et méthodes
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3. Pipettez autant d'eau de Javel que possible sans déranger les tissus dissous et les spicules.
4. Égoutter dans de l'eau pour remédier soigneusement aux spicules; laisser durer les spicules
pendant 10 à 15 minutes; répéter plusieurs fois.
5. Pipettez l'eau comme à l'étape 3 et rechargez avec 100% d'éthanol pour ré-endiguer les
spicules.
6. Aspirez la suspension de spicule en pipette.
7. Égouttez délicatement sur le glissement de la glissière, répandez-vous un peu avec une pointe
de pipette, séchez de l'éthanol, ajoutez un support de montage et ajoutez une lamelle.
On a réalisé ce protocole d’identification des cycles selon les moyens disponible dans le
laboratoire d’aquacultureDonc après avoir préparé les lame on a passé pour voir sous microscope
liée avec une camera
3.2 Extraction
Méthode 1
L’échantillon lyophilisé de l’éponge marine C. crambe (11.65 g) a été mis à macérer
successivement dans le mélange des solvants CH2Cl2/MeOH (1:1). Après, les solvants
organiques ont été évaporés sous la hôte à température ambiante.
Les extraits bruts, obtenus sont référencés, photographiés. Ces extrais sont ensuite stockés à -18°C en attendant l’identification par la méthode chromatographique. Chromatographie en phase
gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC / MS ) (Bondu et al., 2012) .
CH2Cl2/MeOH (1:1)
Évaporation à
température ambiante
GC/MS
Macération (24h)
Éponge lyophilisée
(11.65 g)
Extrait brut(48h)
Identification
Figure 17 : Schéma représentatif de la méthode d’extraction 1
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3. Pipettez autant d'eau de Javel que possible sans déranger les tissus dissous et les spicules.
4. Égoutter dans de l'eau pour remédier soigneusement aux spicules; laisser durer les spicules
pendant 10 à 15 minutes; répéter plusieurs fois.
5. Pipettez l'eau comme à l'étape 3 et rechargez avec 100% d'éthanol pour ré-endiguer les
spicules.
6. Aspirez la suspension de spicule en pipette.
7. Égouttez délicatement sur le glissement de la glissière, répandez-vous un peu avec une pointe
de pipette, séchez de l'éthanol, ajoutez un support de montage et ajoutez une lamelle.
On a réalisé ce protocole d’identification des cycles selon les moyens disponible dans le
laboratoire d’aquacultureDonc après avoir préparé les lame on a passé pour voir sous microscope
liée avec une camera
3.2 Extraction
Méthode 1
L’échantillon lyophilisé de l’éponge marine C. crambe (11.65 g) a été mis à macérer
successivement dans le mélange des solvants CH2Cl2/MeOH (1:1). Après, les solvants
organiques ont été évaporés sous la hôte à température ambiante.
Les extraits bruts, obtenus sont référencés, photographiés. Ces extrais sont ensuite stockés à -18°C en attendant l’identification par la méthode chromatographique. Chromatographie en phase
gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC / MS ) (Bondu et al., 2012) .
CH2Cl2/MeOH (1:1)
Évaporation à
température ambiante
GC/MS
Macération (24h)
Éponge lyophilisée
(11.65 g)
Extrait brut(48h)
Identification
Figure 17 : Schéma représentatif de la méthode d’extraction 1