Chapitre II : Matériel et méthodes
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3. Partie expérimentale
3.1 Préparations de spicules
Il existe plusieurs façons de préparer des lames microscopiques nécessaires à l'identification
taxonomique. Deux sont d'une utilisation générale et relativement simple, des agents de
blanchiment et d'acide nitrique.
Dans notre étude nous avons travaillé avec la méthode de blanchiment.
Préparation du blanchiment:
Selon Kelly-Borges et Pomponi il s'agit d'une méthode «rapide et sale», adaptée aux
identifications rapides de toutes les éponges portant des spicules, y compris Calcarea.
Nous avons utilisé :
-les petits conteneurs en plastique comme les eppendorfs
- eau de javel domestique diluée
-96% d'éthanol dans une bouteille de pression
- eau distillée dans une bouteille de pression
-lames ou armoises
-Perri pour couper l'éponge
-pipettes désaisonnables
1. Coupez une petite partie de l'ectosome et du choanosome (3 mm cubes) sur la boîte à pétri et
placez-les dans l'eppendorf (rincer les ustensiles entre les spécimens). Eppendorf du couvercle
d'étiquette avec le numéro d'échantillon.
2. Remplissez à moitié chaque eppendorf avec de l'eau de Javel et laissez reposer pendant 30 à
60 minutes selon la consistance de l'éponge.
REMARQUE: si vous n'avez pas besoin d'un support permanent de vos spicules, vous pouvez
regarder la suspension spicule-blanchiment posée à partir de l'eppendorf et la glisser sur une
glissière surmontée d'une lamelle.