Chapitre II
Matériel et méthodes
36
- Déposer une lamelle sur la cellule de Malassez;
- Remplir la chambre de comptage avec l’échantillon à l’aide d’une pipette Pasteur. La
goutte ne doit pas déborder dans les rigoles de l’hématimètre et doit recouvrir
complètement et d’un seul coup toute la surface quadrillée de l’hématimètre;
- Attendre au moins 5-10 minutes, avant d’entreprendre le comptage (les éléments
cellulaires doivent sédimenter);
- Observer à l’objectif ×10 pour repérer la position du quadrillage, et vérifier l’homogénéité
de la répartition des cellules à compter;
- Observer ensuite à l’objectif ×40 pour réaliser le comptage.
Il existe une convention indiquant que si les cellules touchent la partie supérieure ou la partie
gauche du cadre, elles sont comptabilisées mais si elles touchent la partie inférieure et droite, elles
ne le sont pas.
Le calcul du nombre de cellules est donné selon l’équation suivante :
Nombre de cellules = n / V (cellules/ml)
Où ;
n : nombre de cellules comptées
V : volume de comptage
5.3 Mesure de la concentration
La concentration d’une culture peut être évaluée par l’intensité de sa couleur. On utilise pour cela
un disque de Secchi (Figure II.19) : il s’agit d’une règle graduée à l’extrémité de laquelle se trouve
fixé perpendiculairement un petit disque blanc.
Le disque de Secchi gradué est plongé dans la culture après son homogénéisation, la profondeur, en
centimètres, où le disque cesse d’être visible est notée.