_____________________________ CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES
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II-1-5-3-Test de la catalase :
Pour la cellule, le H 2 O 2 est considérée comme molécule hautement réactive et potentiellement
nocive. L’enzyme catalase transforme le H 2 O 2 en deux molécules eau et oxygène comme la
réaction suivante :
H 2 O 2
H 2 O + O 2
Mode opératoire :
 Déposer sur une lame stérile une goutte d’eau oxygénée (H 2 O 2 ).
 Prélever une colonie bien isolée à l’aide de l’anse stérile.
 Dissocier la colonie dans la goutte.
Lecture :
Catalase positif : apparition des bulles d’air.
Catalase négatif : pas de bulles d’air.
II-1-5-4- Identification par système Galerie API20E
C’est un système de 20 tests miniaturisés et déshydratés, prêt à l’emploi permettant de réaliser
20 tests biochimiques afin d’identifier les entérobactéries en particuliers et les autres bactéries
à gram négatif.
Mode opératoire
- Mélanger une seule colonie avec 5ml d’eau distillée stérile.
- Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur
stérile, pointe appuyée à l’intérieur et sur le coté pour éviter la formation de bulles.
Pour certains caractères :
Remplir de suspension le tube et la cupule (CIT, VP, GEL)
Remplir le tube de suspension et le recouvrir par l’huile de paraffine (ADH, LDC, ODC, H 2 S,
URE)
catalase