Matériel et méthodes
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Les germes recherchés :
II.4.2.1 Coliformes totaux et fécaux
On a ensemencée 4 séries de 3 tubes contenant le BLBVB de coloration verte et la cloche de
Durham avec 1ml de la solution mère et des différentes dilutions (10
-2 à 10
-4 ). Les tubes ont
été incubés à 44°C pendant 24à 48h.
On a répété cette opération pour chaque station.
Les résultats positifs correspondent à la présence de trouble et la production du gaz dans les
cloches de Durham (>1 /10 de volume).
Enfin on compte le nombre des tubes positifs pour chaque dilution et on fait la lecture du NPP
correspondant en utilisant la table de Mc Grady(Annexe).
Pour rechercher Escherichia Coli :
On prend les tubes positifs de bouillon BLBVB et repiquer 1ml dans un bouillon Schuber
puis on rajoute 2 à 3 gouttes de réactif de Kovacs. L’apparition d’un anneau rouge est
synonyme de présence d’E. coli.
II.4.2.2 Les entérocoques
Test présomptif :
On a ensemencé 4 séries de 3 tubes contenant bouillon Rothe avec 1ml de la solution mère et
de ces dilutions (10¯² à 10¯⁴) incubé à 37°C pendant 24h. On a répété cette opération pour
chaque station.
Les résultats positifs se traduisent par l’apparition de trouble.
Test confirmatif :
On prend 1ml de chaque tube positif et on l’ensemence dans 5ml de bouillon Litsky ;
l’incubation se fait à 37°C pendant 24H. Les résultats positifs se traduisent par l’apparition
d’un trouble.