Matériel et méthodes
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II.4.2 Sédiment
Pour le sédiment on a utilisé la méthode du nombre le plus probable (NPP) pour le
dénombrement des coliformes selon la norme NF T90-413. Cette méthode est basée sur la
propriété commune des coliformes à fermenter le lactose dans une période de 24-48h ainsi
qu’à la production de gaz dans les cloches de Durham.L’existence des germes recherchés se
traduit par un trouble de liquide et un dégagement de gaz dans les cloches.
Préparation de la solution mère :
On pèse 1g de sédiment et on le dissout dans 9ml d’eau distillée stérile.
Préparation des dilutions :
On a préparé 3 séries de tubes contenant du bouillon lactosé bilié au vert brillant (BVBL)
muni de cloche de Durham. Chacun des 3 tubes de la première série reçoit 1 ml de la dilution
10
-1 (solution mère). Les tubes de la deuxième, troisième, et quatrième série reçoivent 1ml de
la dilution 10¯²et 1ml de la solution 10 ³(pour la dernière dilution on jette 1ml).
L’ensemble des tubes ainsi préparé est incubé à 37°C pendant 24-48 h. Le nombre
caractéristique formé sera lu dans la table de Mc Grady. (Annexes).
Figure 12: la méthode de dilution NPP.