Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
34
Figure 24: Test des souches actives.
II.12 Extraction des métabolites à partir des filtrats fongiques
II.12.1 Extraction liquide-liquide
La méthode d’extraction liquide-liquide (ELL) permette le transfert d’un soluté initialement
contenu dans une phase liquide vers une autre phase liquide non miscible (Abe et al, 2010), cette
méthode est utilisée dans notre cas afin de purifier et concentrer les métabolites primaires et
secondaires libérés dans les jus de fermentation après dix jours d’incubation à 25°C, de six souches
fongiques (Aspergillus, Penicillium, Mucor et Fusarium) suite aux résultats issus à partir de test de
toxicité aiguë sur Artemia salina. Ces métabolites vont être décréter par une méthode
chromatographique sur couches minces (Cf. Figure 25 - page suivante).
Le mélange binaire de solvants utilisés dans cette première étape, est composé de chloroforme,
méthanol plus le jus de fermentation, volume par volume 25 ml : 25 ml : 25 ml respectivement,
après la formation de deux phases, la phase aqueuse est versée dans une ampoule à décompter et
disposer sur un évaporateur rotatif pour l’évaporation sous vide des solvants organiques. Ensuite, la
récupération du contenu est effectuée dans 1ml de chloroforme et 0, 5 ml de méthanol (Folch et al.,
1957), pour la séparation sur CCM (Cf. Figure 26-page suivante).
MATERIEL ET METHODES
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Figure 24: Test des souches actives.
II.12 Extraction des métabolites à partir des filtrats fongiques
II.12.1 Extraction liquide-liquide
La méthode d’extraction liquide-liquide (ELL) permette le transfert d’un soluté initialement
contenu dans une phase liquide vers une autre phase liquide non miscible (Abe et al, 2010), cette
méthode est utilisée dans notre cas afin de purifier et concentrer les métabolites primaires et
secondaires libérés dans les jus de fermentation après dix jours d’incubation à 25°C, de six souches
fongiques (Aspergillus, Penicillium, Mucor et Fusarium) suite aux résultats issus à partir de test de
toxicité aiguë sur Artemia salina. Ces métabolites vont être décréter par une méthode
chromatographique sur couches minces (Cf. Figure 25 - page suivante).
Le mélange binaire de solvants utilisés dans cette première étape, est composé de chloroforme,
méthanol plus le jus de fermentation, volume par volume 25 ml : 25 ml : 25 ml respectivement,
après la formation de deux phases, la phase aqueuse est versée dans une ampoule à décompter et
disposer sur un évaporateur rotatif pour l’évaporation sous vide des solvants organiques. Ensuite, la
récupération du contenu est effectuée dans 1ml de chloroforme et 0, 5 ml de méthanol (Folch et al.,
1957), pour la séparation sur CCM (Cf. Figure 26-page suivante).