Chapitre 2 : Matériels et Méthodes
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Le filtre a été pesé avant et après filtration et séchage à l’étuve (MEMMERT) pendant
une heure à 70C°. La différence de poids permet de connaitre le poids sec total de la matière en
suspension dans le volume filtré (AMINOTE et CHAUSSEPIED, 1983).
MES= [(P2-P1) /V] *100
Avec P1 : poids du filtre avant filtration (mg).
P2 : poids du filtre après filtration (mg).
V : volume d’eau filtrée (litre).
Le dosage de la chlorophylle a dans l’eau a été réalisée suivant la méthode
spectrophotométrie monochromatique décrite par AMINOTE et KEROUEL, (2004) à l’aide
de solvant (acétone à 90 %).
 Mode opératoire :
L’eau de mer (0.75 L) a été filtré sur un (filtre A/E Gelman 0.45µm), à l’aide d’une rampe
de filtrations (MILLIPORE).
Deux gouttes de carbonate de magnésium ont été ajoutées pour éviter l’altération de la
chlorophylle.
Les filtres ont été pliés une première fois à l’aide de pinces, (face chargée à l’intérieur)
puis une deuxième fois. Ces filtres recouverts de papier aluminium ont été congelés à basse
température jusqu’au dernier échantillonnage (juillet 2021), ou on a fait l’extraction de tous les
filtres à la fois.
 Extraction : elle repose sur les étapes suivantes :
- Introduire la membrane filtrante dans un tube à centrifuger recouvert du papier
aluminium, contenant 10 ml d’acétone à 90%.
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube en verre à embout coupant.
- Agiter vigoureusement pour disperser les fibres, et laisser l’extraction acétonique se
poursuivre une nuit au réfrigérateur.
- Après l’extraction centrifuger les tubes (bouchés) pendant 5 à 10 min à 3000 - 4000 tr
par minute. Transférer le surnageant dans la cuve du spectrophotomètre.
 Mesure spectrophotométrique : elle repose sur les étapes suivantes :
a) La mesure du blanc de la cuve (bc λ ) :