Matériel et méthodes
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-La concentration de la solution sera donc 26.6 mg/l de caroténoïdes, à partir de laquelle on
prépare les différents standards aux différentes concentrations (mg/l) : 1, 2, 5, 10, 15 mg/l (Voir
annexe figure 10).
-On dilue 1000 fois chaqu‟un de nos échantillon afin qu‟il fasse partie de l‟intervalle de la
gamme étalon préparée.
-On met dans une cuve une quantité de chaque standard puis on l‟introduit dans un
spectrophotomètre visible /UV, après avoir régler la longueur d‟onde à 450 nm qui correspond au
maximum d‟absorbance du β carotène.
III.4.2. Dosage de la chlorophylle
Pour y procéder, on dilue 1 ml de l‟extrait dans 9 ml d‟éthanol 90°.
III.4.3. Dosage de la phycocyanine
Les diluants dépendent de la méthode utilisée pour extraire la phycocyanine brute.
 Mode opératoire
-Pour y procéder, on prélève 1 ml de chaque extrait qu‟on le dilue soit avec
- 99 ml d‟eau ;
- 99 ml de tampon phosphate ;
- 99 ml de solution phosphate ou de solution glucosée.
-On prend une quantité de chaqu‟un des trois standard, qu‟on met dans une cuve à
spectrophotomètre visible /UV afin de lire les absorbances à des longueurs d‟ondes prédéfinies (à
280 nm, à 615 nm, à 620 nm et à 652 nm).
IV. Analyse qualitatives spectrale
L‟analyse qualitative pour identifier les différents spectres a été réalisée au laboratoire LBCM2
de l‟ENSSMAL.
IV.1. Identification des différents spectres des pigments de la spiruline
En absence d‟un spectrophotomètre à balayage nous avons procédé à déterminer les différents
spectres des pigments extraits en traduisant leurs données de dosage quantitatif sous forme de
balayages allant respectivement de [400 nm – 700 nm], [400 nm – 700 nm] et de [200 nm – 800
nm] pour chaqu‟un des pigments caroténoïdes, chlorophylles et phycocyanine.