Chapitre Ⅲ : matériel et méthodes
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III.9 La croissance des bactéries sur différentes sources de carbone
Dans des tubes à essai stériles on a inoculé 100 µL de suspension bactérienne dans 5 ml de milieu
ONR7a, puis on leur a rajouté 50 µL d’hydrocarbure (1% V/V). Pour cette étude on a utilisé 4
différentes sources de carbone, deux aliphatiques étant l’Hexadécane et l’Octadécane, et deux
autres aromatiques étant le Benzène et le Toluène. Des blancs ont été préparés pour chaque
sources de carbone et ces tubes ont étaient soumis aux mêmes conditions.
Les tubes ont été ensuite mis au bain marie agitateur à une température de 30°C pendant 10 jours.
A la fin de la période on mesure leur absorbance par rapport au blanc à une D.O = 600 nm à
l’aide d’un spectrophotomètre (UV-Vis JASCO V-730) (Figure Ⅲ.13).
Figure Ⅲ.13. Spectrophotomètre JASCO V-730
III.10
Production des biofilms
Préparation des bactéries
Les bactéries ont été inoculés dans des tubes à essais stériles contenant 5 ml de milieu ONR7a.
Ces suspensions ont été cultivés jusqu’à la phase stationnaire.
Les cultures ont ensuite été diluées à 1/100 dans un milieu frais.
On a prélevé 100 µl des cultures diluées à l’aide d’une micropipette et on les a déposés dans les
puits de la microplaque, et on a rajouté un blanc qui va agir comme témoin. Il est recommandé
de faire 3 répliquât pour avoir des résultats statistiquement représentatifs.
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III.9 La croissance des bactéries sur différentes sources de carbone
Dans des tubes à essai stériles on a inoculé 100 µL de suspension bactérienne dans 5 ml de milieu
ONR7a, puis on leur a rajouté 50 µL d’hydrocarbure (1% V/V). Pour cette étude on a utilisé 4
différentes sources de carbone, deux aliphatiques étant l’Hexadécane et l’Octadécane, et deux
autres aromatiques étant le Benzène et le Toluène. Des blancs ont été préparés pour chaque
sources de carbone et ces tubes ont étaient soumis aux mêmes conditions.
Les tubes ont été ensuite mis au bain marie agitateur à une température de 30°C pendant 10 jours.
A la fin de la période on mesure leur absorbance par rapport au blanc à une D.O = 600 nm à
l’aide d’un spectrophotomètre (UV-Vis JASCO V-730) (Figure Ⅲ.13).
Figure Ⅲ.13. Spectrophotomètre JASCO V-730
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Production des biofilms
Préparation des bactéries
Les bactéries ont été inoculés dans des tubes à essais stériles contenant 5 ml de milieu ONR7a.
Ces suspensions ont été cultivés jusqu’à la phase stationnaire.
Les cultures ont ensuite été diluées à 1/100 dans un milieu frais.
On a prélevé 100 µl des cultures diluées à l’aide d’une micropipette et on les a déposés dans les
puits de la microplaque, et on a rajouté un blanc qui va agir comme témoin. Il est recommandé
de faire 3 répliquât pour avoir des résultats statistiquement représentatifs.