288__________________________________Biochimie clinique
- Colorimétrie après diai.ota.tion. Le diazo-réactif, l'acide sulfanilique diazoté, coupe la molécule de bilirubine en deux fragments dipyrroliques. Dans la
technique de Jendrassik et Grof, la coloration obtenue est bleue à pH alcalin et
rouge à pH neutre ou acide.
La réaction est instantanée avec la bilirubine soluble dans l'eau, conjuguée et
dite « directe ». Une solubilisation est nécessaire pour la bilirubine libre, grâce
au méthanol ou à des agents tels que caféine, benzoate de sodium, produits tensioactifs (Brij). Deux dosages, avec et sans adjuvant de solubilisation, permettent ainsi d'appréhender les deux formes principales directe et indirecte.
- Bilirubine libre non liée à l'albumine. En cas d'hémolyse majeure (incompatibilité fœto-matemelle par exemple), la bilirubine libre peut dépasser les possibilités de fixation de la sérum-albumine. Le risque de dépôt au niveau des
noyaux gris centraux est alors réel et l'exsanguinotransfusion doit être réalisée
avant. La mesure de cette variété de bilirubine libre nécessite une chromatographie sur Séphadex G25 qui retient le pigment non lié à l'albumine.
- Delta-Bilirubine. C'est une bilirubine libre liée covalentiellement à la
sérum-albumine qui donne donc une réaction directe. La bilirubine directe est
donc la somme suivante :
Bilirubine directe = bilirubine Delta + bilirubine conjuguée (c'est-à-dire
l'ensemble des di-glycuronoconjugués et des mono-glycuronoconjugués). Le
dosage de la bilirubine Delta est réalisé très facilement par les techniques de
« chimie sèche » des automates Ortho (Vitros).
Donc la bilirubine totale est la somme des fractions suivantes :
Bilirubine totale = bilirubine Delta + bilirubine conjuguée + bilirubine non
conjuguée.
5.
Acide urique
L'acide urique est chez l'homme, qui a perdu l'uricase au fil de l'évolution, le
terme du catabolisme des purines. Sa faible solubilité dans l'eau explique la
pathologie de surcharge, observée au cours des très fréquentes hyperuricémies.
5.1. Rappels biochimiques et physiologiques
5.7.7. Origines endogènes et exogènes de l'acide urique
L'acide urique (figure 11.7) provient des purines :
- exogènes, issues de l'alimentation camée (viandes jeunes, abats, ris de
veau);
- endogènes. Pour celles-ci, on peut ainsi envisager :
Une origine immédiate, proche, à partir des deux bases puriques des acides
nucléiques, adénine et guanine, qui sont désaminées respectivement en
- Colorimétrie après diai.ota.tion. Le diazo-réactif, l'acide sulfanilique diazoté, coupe la molécule de bilirubine en deux fragments dipyrroliques. Dans la
technique de Jendrassik et Grof, la coloration obtenue est bleue à pH alcalin et
rouge à pH neutre ou acide.
La réaction est instantanée avec la bilirubine soluble dans l'eau, conjuguée et
dite « directe ». Une solubilisation est nécessaire pour la bilirubine libre, grâce
au méthanol ou à des agents tels que caféine, benzoate de sodium, produits tensioactifs (Brij). Deux dosages, avec et sans adjuvant de solubilisation, permettent ainsi d'appréhender les deux formes principales directe et indirecte.
- Bilirubine libre non liée à l'albumine. En cas d'hémolyse majeure (incompatibilité fœto-matemelle par exemple), la bilirubine libre peut dépasser les possibilités de fixation de la sérum-albumine. Le risque de dépôt au niveau des
noyaux gris centraux est alors réel et l'exsanguinotransfusion doit être réalisée
avant. La mesure de cette variété de bilirubine libre nécessite une chromatographie sur Séphadex G25 qui retient le pigment non lié à l'albumine.
- Delta-Bilirubine. C'est une bilirubine libre liée covalentiellement à la
sérum-albumine qui donne donc une réaction directe. La bilirubine directe est
donc la somme suivante :
Bilirubine directe = bilirubine Delta + bilirubine conjuguée (c'est-à-dire
l'ensemble des di-glycuronoconjugués et des mono-glycuronoconjugués). Le
dosage de la bilirubine Delta est réalisé très facilement par les techniques de
« chimie sèche » des automates Ortho (Vitros).
Donc la bilirubine totale est la somme des fractions suivantes :
Bilirubine totale = bilirubine Delta + bilirubine conjuguée + bilirubine non
conjuguée.
5.
Acide urique
L'acide urique est chez l'homme, qui a perdu l'uricase au fil de l'évolution, le
terme du catabolisme des purines. Sa faible solubilité dans l'eau explique la
pathologie de surcharge, observée au cours des très fréquentes hyperuricémies.
5.1. Rappels biochimiques et physiologiques
5.7.7. Origines endogènes et exogènes de l'acide urique
L'acide urique (figure 11.7) provient des purines :
- exogènes, issues de l'alimentation camée (viandes jeunes, abats, ris de
veau);
- endogènes. Pour celles-ci, on peut ainsi envisager :
Une origine immédiate, proche, à partir des deux bases puriques des acides
nucléiques, adénine et guanine, qui sont désaminées respectivement en