' Protéines plasmatiques__________________________________233
' 4.2.2.2. Marque fluorescente
Les méthodes les plus classiques sont :
- la méthode utilisant la protection de fluorescence avec deux Ac : l'un
dirigé contre l'Ag à doser et l'autre dirigé contre l'Ag marqué non lié permettant sa neutralisation.
- la polarisation de fluorescence (FPIA ou « fluorescence polarization
immuno assay »). Si l'on excite des molécules fluorescentes par une lumière
polarisée et si l'on mesure l'intensité de lumière fluorescente dans les directions
parallèle et perpendiculaire à la lumière incidente, on définit un taux de polarisation de la lumière de fluorescence.
Une décroissance de la polarisation de fluorescence est observée lorsqu'il y a
compétition entre l'Ag marqué et l'Ag non marqué pour les sites de liaison sur
l'Ac et cela se prête aisément à la mesure.
4.2.3. Techniques de localisation microscopique
II s'agit de techniques très particulières (immunoenzymologie cellulaire,
immunofluorescence à l'examen microscopique, analyse et comptage de particules fluorescentes par cytofluorimétrie de flux) rentrant dans le cadre des
études microscopiques en anatomie pathologique ou parasitologie par exemple.
Ces techniques ne seront pas abordées ici.
^
4.3. Observation d'un effet biologique de la réaction immunitaire
^ i
II peut s'agir de lyse cellulaire observée sur des hématies, sur des lymphocytes, sur des micro-organismes ou sur des liposomes.
Il peut aussi être question de mobilité cellulaire étudiée par exemple lors des
tests d'immobilisation des spermatozoïdes ou du test d'inhibition de la migration des macrophages.
Parfois ce sont des études de différenciation ou de modification cellulaires
comme le test de transformation blastique des lymphocytes ou le test de dégranulation des polynucléaires basophiles.
Le grand nombre de ces tests, leur défaut de spécificité expliquent le manque
d'engouement actuel pour ces analyses.
' 4.2.2.2. Marque fluorescente
Les méthodes les plus classiques sont :
- la méthode utilisant la protection de fluorescence avec deux Ac : l'un
dirigé contre l'Ag à doser et l'autre dirigé contre l'Ag marqué non lié permettant sa neutralisation.
- la polarisation de fluorescence (FPIA ou « fluorescence polarization
immuno assay »). Si l'on excite des molécules fluorescentes par une lumière
polarisée et si l'on mesure l'intensité de lumière fluorescente dans les directions
parallèle et perpendiculaire à la lumière incidente, on définit un taux de polarisation de la lumière de fluorescence.
Une décroissance de la polarisation de fluorescence est observée lorsqu'il y a
compétition entre l'Ag marqué et l'Ag non marqué pour les sites de liaison sur
l'Ac et cela se prête aisément à la mesure.
4.2.3. Techniques de localisation microscopique
II s'agit de techniques très particulières (immunoenzymologie cellulaire,
immunofluorescence à l'examen microscopique, analyse et comptage de particules fluorescentes par cytofluorimétrie de flux) rentrant dans le cadre des
études microscopiques en anatomie pathologique ou parasitologie par exemple.
Ces techniques ne seront pas abordées ici.
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4.3. Observation d'un effet biologique de la réaction immunitaire
^ i
II peut s'agir de lyse cellulaire observée sur des hématies, sur des lymphocytes, sur des micro-organismes ou sur des liposomes.
Il peut aussi être question de mobilité cellulaire étudiée par exemple lors des
tests d'immobilisation des spermatozoïdes ou du test d'inhibition de la migration des macrophages.
Parfois ce sont des études de différenciation ou de modification cellulaires
comme le test de transformation blastique des lymphocytes ou le test de dégranulation des polynucléaires basophiles.
Le grand nombre de ces tests, leur défaut de spécificité expliquent le manque
d'engouement actuel pour ces analyses.