144____________________________________Biochimie clinique
style (idéal pour les glycémies itératives des hyper et hypoglycémies provoquées) ou au talon pour le nourrisson.
Lorsque l'échantillon doit attendre plus d'une heure, entre le prélèvement et
l'analyse, le sang doit être recueilli sur un inhibiteur de la glycolyse (fluorure
de sodium qui est un antiglycolytique par formation d'un complexe fluorophosphomagnésien éliminant du milieu le magnésium indispensable à l'action de
l'énolase). Ce prélèvement conserve son glucose intact pendant six heures.
Cependant l'échantillon est hémolyse et la présence du fluorure de sodium
empêche tout autre type de dosage sur ce prélèvement.
Le prélèvement doit être effectué chez un sujet strictement à jeun depuis
10 heures. La principale cause d'erreur par excès à côté de l'absence de cette
précaution est la classique perfusion intra-veineuse de sérum glucose, erreur très
fréquente en milieu hospitalier.
2.2.1. Méthodes de dosage
Les méthodes enzymatiques représentent 99 % des techniques utilisées. 80 %
utilisent la glucose oxydase, 7 % l'hexokinase.
Parmi les principes méthodologiques les plus utilisés, nous citerons celui utilisant le réactif de Trinder et une technique mettant en jeu une électrode.
PEROXYDASE
GLUCOSE OXYDASE
RÉACTIF RÉDUIT INCOLORE
COMPLEXE ROUGE
absorbe à 525 nm
Figure 6.3 • Schéma reactionnel par la méthode de Trinder.
À l'aide d'un spectrophotomètre, l'intensité de la réaction colorée (absorbance) est mesurée à 525 nm.
Cette méthode peut aussi être réalisée à l'aide de bandelettes réactives (ressemblant à celles utilisées pour les urines) dont l'extrémité, imprégnée de réactifs, reçoit une goutte de sang. La variation de coloration est appréciée soit visi-
style (idéal pour les glycémies itératives des hyper et hypoglycémies provoquées) ou au talon pour le nourrisson.
Lorsque l'échantillon doit attendre plus d'une heure, entre le prélèvement et
l'analyse, le sang doit être recueilli sur un inhibiteur de la glycolyse (fluorure
de sodium qui est un antiglycolytique par formation d'un complexe fluorophosphomagnésien éliminant du milieu le magnésium indispensable à l'action de
l'énolase). Ce prélèvement conserve son glucose intact pendant six heures.
Cependant l'échantillon est hémolyse et la présence du fluorure de sodium
empêche tout autre type de dosage sur ce prélèvement.
Le prélèvement doit être effectué chez un sujet strictement à jeun depuis
10 heures. La principale cause d'erreur par excès à côté de l'absence de cette
précaution est la classique perfusion intra-veineuse de sérum glucose, erreur très
fréquente en milieu hospitalier.
2.2.1. Méthodes de dosage
Les méthodes enzymatiques représentent 99 % des techniques utilisées. 80 %
utilisent la glucose oxydase, 7 % l'hexokinase.
Parmi les principes méthodologiques les plus utilisés, nous citerons celui utilisant le réactif de Trinder et une technique mettant en jeu une électrode.
PEROXYDASE
GLUCOSE OXYDASE
RÉACTIF RÉDUIT INCOLORE
COMPLEXE ROUGE
absorbe à 525 nm
Figure 6.3 • Schéma reactionnel par la méthode de Trinder.
À l'aide d'un spectrophotomètre, l'intensité de la réaction colorée (absorbance) est mesurée à 525 nm.
Cette méthode peut aussi être réalisée à l'aide de bandelettes réactives (ressemblant à celles utilisées pour les urines) dont l'extrémité, imprégnée de réactifs, reçoit une goutte de sang. La variation de coloration est appréciée soit visi-