Résultats et discussion
Étude chimique des saponines d’E. sepositus
200
IV.3. Analyse par résonance magnétique nucléaire
Compte tenu de la nature de nos extraits qui sont des mélanges de composés, on attend à
obtenir des spectres RMN (proton et carbone) avec des signaux qui se chevauchent, et
complique donc l’interprétation des spectres. Néanmoins, nos extraits comprennent deux
composés majoritaires (sepositoside A et luzonicoside) et les autres sont mineurs. De ce fait,
les signaux RMN attendus sont des signaux associés à la structure des composés majoritaires
ce qui est susceptible de donner des spectres faciles à interpréter.
De plus, le couplage interatomique qui est visible par l’analyse des spectres bidimensionnels
permet d’élucider aisément la structure chimique des composés majoritaires.
Il serait donc intéressant d’analyse les saponines par RMN. Cette approche permettra, d’une
part, de valider la structure de l’aglycone, d’autre part, d’identifier les sucres de la chaine
saccharidique.
IV.2.1. Élucidation structurelle de la sepositoside A
Selon les résultats d’analyse par spectrométrie de masse la sepositoside A est le composé
prédominant dans tous les organes. De ce fait, les différents extraits peuvent être utilisés pour
élucider cette structure. Cependant, nous avons préconisé d’utiliser les saponines de tégument
oral dont l’abondance relative des autres saponines est relativement faible, notamment l’ion
m/z 981 qui correspond à la luzonicoside (Fig. 42).
a. Détermination de l’aglycone
Le spectre RMN-13C a mis en évidence dans la zone d’aglycone 27 atomes de carbone, dont :
5 méthyles (CH 3 ): CH3-18, CH3-19, CH3-21,CH3-26 et CH3-27; 9 méthylènes (carbones
secondaires CH 2 ): CH2-1, CH2-2, CH2-4, CH2-11, CH2-12, CH2-15, CH2-16, CH2-22, CH223; 9 Méthines (carbones tertiaires CH): CH-3, CH-5, CH-6, CH-7, CH-9, CH-14, CH-17,
CH-20, CH-25; 2 carbones quaternaires (C): C10, C13.
Tous les signaux des carbones et des protons sont déterminés et attribués d’après l’analyse des
spectres HSQC et HMBC, COSY, NOESY. Les signaux caractéristiques d’aglycone de
tégument oral sont reportés dans le tableau 46.
Dans l’aglycone deux méthines CH-3(δ H 3,87, δC 76,5) et CH-6(δ H ,.44, δC 76,9) attaché à
l’oxygène; une double liaison 7(8) (δ H 5,54, δC117,6; 142,0) et une fonction cétone en C-23(δC
212.6) ont été mises en évidence.
Étude chimique des saponines d’E. sepositus
200
IV.3. Analyse par résonance magnétique nucléaire
Compte tenu de la nature de nos extraits qui sont des mélanges de composés, on attend à
obtenir des spectres RMN (proton et carbone) avec des signaux qui se chevauchent, et
complique donc l’interprétation des spectres. Néanmoins, nos extraits comprennent deux
composés majoritaires (sepositoside A et luzonicoside) et les autres sont mineurs. De ce fait,
les signaux RMN attendus sont des signaux associés à la structure des composés majoritaires
ce qui est susceptible de donner des spectres faciles à interpréter.
De plus, le couplage interatomique qui est visible par l’analyse des spectres bidimensionnels
permet d’élucider aisément la structure chimique des composés majoritaires.
Il serait donc intéressant d’analyse les saponines par RMN. Cette approche permettra, d’une
part, de valider la structure de l’aglycone, d’autre part, d’identifier les sucres de la chaine
saccharidique.
IV.2.1. Élucidation structurelle de la sepositoside A
Selon les résultats d’analyse par spectrométrie de masse la sepositoside A est le composé
prédominant dans tous les organes. De ce fait, les différents extraits peuvent être utilisés pour
élucider cette structure. Cependant, nous avons préconisé d’utiliser les saponines de tégument
oral dont l’abondance relative des autres saponines est relativement faible, notamment l’ion
m/z 981 qui correspond à la luzonicoside (Fig. 42).
a. Détermination de l’aglycone
Le spectre RMN-13C a mis en évidence dans la zone d’aglycone 27 atomes de carbone, dont :
5 méthyles (CH 3 ): CH3-18, CH3-19, CH3-21,CH3-26 et CH3-27; 9 méthylènes (carbones
secondaires CH 2 ): CH2-1, CH2-2, CH2-4, CH2-11, CH2-12, CH2-15, CH2-16, CH2-22, CH223; 9 Méthines (carbones tertiaires CH): CH-3, CH-5, CH-6, CH-7, CH-9, CH-14, CH-17,
CH-20, CH-25; 2 carbones quaternaires (C): C10, C13.
Tous les signaux des carbones et des protons sont déterminés et attribués d’après l’analyse des
spectres HSQC et HMBC, COSY, NOESY. Les signaux caractéristiques d’aglycone de
tégument oral sont reportés dans le tableau 46.
Dans l’aglycone deux méthines CH-3(δ H 3,87, δC 76,5) et CH-6(δ H ,.44, δC 76,9) attaché à
l’oxygène; une double liaison 7(8) (δ H 5,54, δC117,6; 142,0) et une fonction cétone en C-23(δC
212.6) ont été mises en évidence.