Matériels et méthodes
Activités biologiques
108
III.1.3. Capacité de réduction de l’hémolyse oxydative par les saponines
Les globules rouges ou érythrocytes sont extrêmement susceptibles aux endommagements
oxydatifs en raison de la richesse de leurs membranes en acides gras polyinsaturés et la
concentration cellulaire élevée en oxygène et en l’hémoglobine. Elles sont un modèle adéquat
pour l’étude du stress oxydant induit par une attaque radicalaire. Cette attaque conduit à la
rupture des membranes plasmique et à la libération d’hémoglobine cellulaire (l’hémolyse).
L’objectif de cette partie est de mesurer la capacité des saponines d’E.sepositus et
d’O.ophidianus à réduire l’hémolyse oxydative. le système d’initiateur des radicaux libres
Cu
+2 /H2O2 est utilisé pour provoquer l’hémolyse des globules rouges.
Le peroxyde d'hydrogène (H2O2) est un pro oxydant naturellement présent dans les cellules, et
c'est l'espèce réactive d’oxygène (ERO) la plus abondante in vivo. La disproportion de sa
concentration, dans certaines conditions, telles que: les fortes doses ou la présence d'ions
métalliques peuvent engendrer des radicaux hydroxyle (HO
) délétères pour les membranes
et autres structures cellulaires. De ce fait, le sulfate de cuivre (Cu
+2 , SO4
-2 ) est utilisé dans
notre travail pour entraîner l'oxydation de lipides et de protéines membranaire et amorcer
l’hémolyse.
La génération des radicaux hydroxyle (HO
- ) en présence de peroxyde d'hydrogène (H2O2) et
de sulfate de cuivre CuSO4 est gérée les réactions suivantes:
Pour évaluer la capacité des saponines à réduire l’hémolyse oxydative induite par le système
d’initiateur de radicaux Cu
+2 /H2O2, on a étudié dans un premier temps l’activité hémolytique
des saponines pour déterminer les concentrations non hémolytiques. Puis nous avons évalué
l’activité antioxydante de ces saponines aux concentrations non hémolytiques en suivant les
étapes suivantes:
- Étape 1: consiste à évaluer l’effet de système (Cu
+2 /H2O2) sur les érythrocytes;
- Étape 2: consiste à évaluer l’effet de saponines aux concentrations non hémolytiques sur
des érythrocytes préalablement traités par le système (Cu
+2 /H2O2);
Cu
2+ +H2O2
Cu
+ +
O2
- +2 H
+
Cu
+ +H2O2
Cu
+ +
- OH +OH
-
Activités biologiques
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III.1.3. Capacité de réduction de l’hémolyse oxydative par les saponines
Les globules rouges ou érythrocytes sont extrêmement susceptibles aux endommagements
oxydatifs en raison de la richesse de leurs membranes en acides gras polyinsaturés et la
concentration cellulaire élevée en oxygène et en l’hémoglobine. Elles sont un modèle adéquat
pour l’étude du stress oxydant induit par une attaque radicalaire. Cette attaque conduit à la
rupture des membranes plasmique et à la libération d’hémoglobine cellulaire (l’hémolyse).
L’objectif de cette partie est de mesurer la capacité des saponines d’E.sepositus et
d’O.ophidianus à réduire l’hémolyse oxydative. le système d’initiateur des radicaux libres
Cu
+2 /H2O2 est utilisé pour provoquer l’hémolyse des globules rouges.
Le peroxyde d'hydrogène (H2O2) est un pro oxydant naturellement présent dans les cellules, et
c'est l'espèce réactive d’oxygène (ERO) la plus abondante in vivo. La disproportion de sa
concentration, dans certaines conditions, telles que: les fortes doses ou la présence d'ions
métalliques peuvent engendrer des radicaux hydroxyle (HO
) délétères pour les membranes
et autres structures cellulaires. De ce fait, le sulfate de cuivre (Cu
+2 , SO4
-2 ) est utilisé dans
notre travail pour entraîner l'oxydation de lipides et de protéines membranaire et amorcer
l’hémolyse.
La génération des radicaux hydroxyle (HO
- ) en présence de peroxyde d'hydrogène (H2O2) et
de sulfate de cuivre CuSO4 est gérée les réactions suivantes:
Pour évaluer la capacité des saponines à réduire l’hémolyse oxydative induite par le système
d’initiateur de radicaux Cu
+2 /H2O2, on a étudié dans un premier temps l’activité hémolytique
des saponines pour déterminer les concentrations non hémolytiques. Puis nous avons évalué
l’activité antioxydante de ces saponines aux concentrations non hémolytiques en suivant les
étapes suivantes:
- Étape 1: consiste à évaluer l’effet de système (Cu
+2 /H2O2) sur les érythrocytes;
- Étape 2: consiste à évaluer l’effet de saponines aux concentrations non hémolytiques sur
des érythrocytes préalablement traités par le système (Cu
+2 /H2O2);
Cu
2+ +H2O2
Cu
+ +
O2
- +2 H
+
Cu
+ +H2O2
Cu
+ +
- OH +OH
-