Matériels et méthodes
Activités biologiques
106
b. Méthodes
Les tests électrochimiques ont été effectués par voltampérométrie cyclique à l’aide d’un
potentiostat/galvanostat PGSTAT 30 Metrohm et piloté par un ordinateur avec le logiciel
GPES (General Purpose Electrochemical System version 4.9, Eco Chemie BV).
La cellule électrochimique est constituée d’une électrode disque de carbone vitreux (diamètre
2 mm) comme électrode de travail, d’une électrode auxiliaire fil de platine comme contre
électrode et d’une électrode de référence Ag/AgCl/LiCl.
La solution analysée est une solution de DMF (N,N-Dimethylformamide) avec comme
électrolyte support un sel d’ hexafluorophosphate de tétrabutyl ammonium Bu4NPF6 à 0,1M.
Les solutions des extraits ont été préparées à différentes concentrations dans le DMF (2 g.L
-1
pour les saponines et 1 g.L
-1 pour les caroténoïdes).
Le voltampérogramme cyclique est enregistré en premier lieu en absence d’ajouts des
saponines ou des caroténoïdes des étoiles de mer étudiées et en deuxième lieu après les
microajouts des extraits.
L’intensité du pic du courant anodique de réoxydation de O2
•- (Ipa0 ) (Fig. 18, courbe A) et
l’intensité du pic du courant anodique de O2
•- pour une concentration donnée d’extrait testé
(Ipas) (Fig. 18, courbe A) sont mesurées.
Afin de faciliter la mesure de la hauteur des pics Ipas et Ipa0, les voltampérogrammes
cycliques obtenus ont été convertis en courbes convoluées semi-dérivées. En effet, en utilisant
les voltampérogrammes cycliques la mesure du courant du pic cathodique (Ipc) est facile
(Fig. 18, courbe B) par contre la mesure du courant du pic anodique (Ipa) est délicate, car
l’estimation de la ligne de base est difficile pour le balayage retour. Les lignes de bases sont
plus simples à définir à partir des courbes convolées car ces dernières présentent des pics
symétriques en balayage aller-retour (Fig. 18, courbe C).
Les variations de (1- Ipas/ Ipa0) en fonction de la concentration des saponines ou des
caroténoïdes ajoutés sont représentées sous forme d’une courbe ce qui permet de déterminer
une concentration en extrait capable de réduire de 30% (AI30) ou 50% (AI50) le courant de pic
anodique.
Activités biologiques
106
b. Méthodes
Les tests électrochimiques ont été effectués par voltampérométrie cyclique à l’aide d’un
potentiostat/galvanostat PGSTAT 30 Metrohm et piloté par un ordinateur avec le logiciel
GPES (General Purpose Electrochemical System version 4.9, Eco Chemie BV).
La cellule électrochimique est constituée d’une électrode disque de carbone vitreux (diamètre
2 mm) comme électrode de travail, d’une électrode auxiliaire fil de platine comme contre
électrode et d’une électrode de référence Ag/AgCl/LiCl.
La solution analysée est une solution de DMF (N,N-Dimethylformamide) avec comme
électrolyte support un sel d’ hexafluorophosphate de tétrabutyl ammonium Bu4NPF6 à 0,1M.
Les solutions des extraits ont été préparées à différentes concentrations dans le DMF (2 g.L
-1
pour les saponines et 1 g.L
-1 pour les caroténoïdes).
Le voltampérogramme cyclique est enregistré en premier lieu en absence d’ajouts des
saponines ou des caroténoïdes des étoiles de mer étudiées et en deuxième lieu après les
microajouts des extraits.
L’intensité du pic du courant anodique de réoxydation de O2
•- (Ipa0 ) (Fig. 18, courbe A) et
l’intensité du pic du courant anodique de O2
•- pour une concentration donnée d’extrait testé
(Ipas) (Fig. 18, courbe A) sont mesurées.
Afin de faciliter la mesure de la hauteur des pics Ipas et Ipa0, les voltampérogrammes
cycliques obtenus ont été convertis en courbes convoluées semi-dérivées. En effet, en utilisant
les voltampérogrammes cycliques la mesure du courant du pic cathodique (Ipc) est facile
(Fig. 18, courbe B) par contre la mesure du courant du pic anodique (Ipa) est délicate, car
l’estimation de la ligne de base est difficile pour le balayage retour. Les lignes de bases sont
plus simples à définir à partir des courbes convolées car ces dernières présentent des pics
symétriques en balayage aller-retour (Fig. 18, courbe C).
Les variations de (1- Ipas/ Ipa0) en fonction de la concentration des saponines ou des
caroténoïdes ajoutés sont représentées sous forme d’une courbe ce qui permet de déterminer
une concentration en extrait capable de réduire de 30% (AI30) ou 50% (AI50) le courant de pic
anodique.