Matériels et méthodes
Activités biologiques
104
III.
Activité biologique
Il existe plusieurs travaux s’étant intéressé aux activités biologiques des métabolites
secondaires des étoiles de mer, notamment l'activité antioxydante (Suguna et
Bragadeeswaran, 2014 et Zhang et Wang et al., 2013) et l’activité hémolytique (Lee et al.,
2013 et Ivanchina et al., 2000).
L’objectif de ce chapitre est de mesurer l’activité anti-oxydante des saponines est des
caroténoïdes isolés à partir d’E.sepositus et d’O.ophidianus. De ce fait, nos extraits ont été
soumis à une série d'expériences impliquant respectivement l'hémolyse (pour l’extrait de
saponine), et la réduction de stress oxydatif pour les extraits des saponines et des
caroténoïdes.
III.1. Activité anti-oxydante
Les méthodes les plus couramment utilisées pour évaluer le pouvoir antioxydant des
molécules bioactives reposent sur la capacité de ces molécules à piéger les espèces
radicalaires.
L’activité antioxydante des saponines des deux étoiles de mer étudiées a été évaluée in vitro
selon trois méthodes, la première évalue le pouvoir antiradicalaire en mesurant le pourcentage
de neutralisation de DPPH
(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl), la deuxième mesure le
pourcentage de neutralisation du radical superoxyde (O2
•) électro généré par des tests
électrochimiques (ces deux méthodes ont été également utilisées pour l’évaluation de
l’activité antioxydante des caroténoïdes étudiée), et la troisième méthode consiste à évaluer la
capacité de réduction de l’hémolyse oxydative induite par des initiateurs de radicaux libres
(Cu
2+
/H2O2).
Les radicaux superoxydes (O2
•) et hydroxyles (OH
•) sont intéressants pour l’étude en raison
de leur existence in vivo en tant qu’espèces réactives de l'oxygène (ERO), et de leur
implication dans les processus dégénératifs des cellules. Leur piégeage est donc considéré
comme une réaction importante permettant une évaluation plus précise des antioxydants
naturels.
III.1.1. Effet scavenger du radical DPPH
Ce test permet de mesurer le pouvoir réducteur des antioxydants par le calcul du pourcentage
d'inhibition de diphényl picryl-hydrazine. Le DPPH
est un radical libre relativement stable de
Activités biologiques
104
III.
Activité biologique
Il existe plusieurs travaux s’étant intéressé aux activités biologiques des métabolites
secondaires des étoiles de mer, notamment l'activité antioxydante (Suguna et
Bragadeeswaran, 2014 et Zhang et Wang et al., 2013) et l’activité hémolytique (Lee et al.,
2013 et Ivanchina et al., 2000).
L’objectif de ce chapitre est de mesurer l’activité anti-oxydante des saponines est des
caroténoïdes isolés à partir d’E.sepositus et d’O.ophidianus. De ce fait, nos extraits ont été
soumis à une série d'expériences impliquant respectivement l'hémolyse (pour l’extrait de
saponine), et la réduction de stress oxydatif pour les extraits des saponines et des
caroténoïdes.
III.1. Activité anti-oxydante
Les méthodes les plus couramment utilisées pour évaluer le pouvoir antioxydant des
molécules bioactives reposent sur la capacité de ces molécules à piéger les espèces
radicalaires.
L’activité antioxydante des saponines des deux étoiles de mer étudiées a été évaluée in vitro
selon trois méthodes, la première évalue le pouvoir antiradicalaire en mesurant le pourcentage
de neutralisation de DPPH
(2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl), la deuxième mesure le
pourcentage de neutralisation du radical superoxyde (O2
•) électro généré par des tests
électrochimiques (ces deux méthodes ont été également utilisées pour l’évaluation de
l’activité antioxydante des caroténoïdes étudiée), et la troisième méthode consiste à évaluer la
capacité de réduction de l’hémolyse oxydative induite par des initiateurs de radicaux libres
(Cu
2+
/H2O2).
Les radicaux superoxydes (O2
•) et hydroxyles (OH
•) sont intéressants pour l’étude en raison
de leur existence in vivo en tant qu’espèces réactives de l'oxygène (ERO), et de leur
implication dans les processus dégénératifs des cellules. Leur piégeage est donc considéré
comme une réaction importante permettant une évaluation plus précise des antioxydants
naturels.
III.1.1. Effet scavenger du radical DPPH
Ce test permet de mesurer le pouvoir réducteur des antioxydants par le calcul du pourcentage
d'inhibition de diphényl picryl-hydrazine. Le DPPH
est un radical libre relativement stable de