CHAPITRE II : Matériel et méthodes
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Figure 12 : Un dispositif de filtration sous vide de marque Sartorius.
La réalisation de la technique de filtration sur membrane a été faite selon les étapes suivantes:
 Désinfecter la paillasse avec l’eau de javel.
 Laver, sécher et stériliser par flambage de l’équipement de filtration et placer
celui-ci et la pompe à vide devant un bec-bunsen.
 , Prendre une membrane filtrante stérile près du bord en utilisant une pince
stérilisée.
 Placer l’entonnoir sur le support et le fixer fermement.
 Verser dans chaque entonnoir un volume 100 ml de d’échantillon bien
homogénéisé.
 Faire le vide jusqu’à filtration totale de l’échantillon ;
 Retirer l’entonnoir et déposer la membrane filtrante à l’aide d’une pincé stérile
sur un milieu adapté aux bactéries recherchées;
 Déposer la membrane en la déroulant pour tenir un contact étroit avec la gélose
(éviter la présence des bulles d’air) ;
 Inscrire sur la boite de Pétri le numéro de l’échantillon, le volume filtré et la
date de l’analyse ;
 Placer les boites de Pétri en position inverse et les incuber à une température et
une durée optimalesde croissance pour chaque germe ;
 Flamberle dispositif à l’aide d’un bec-bunsen après chaque échantillon filtré
pour éviter toutecontamination possible ;