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g/L à 20, 30, 40 à 50 g/L. Inoculer ensuite 100 µL de chaque suspension bactérienne dans le
tube à essai contenant 5 ml de milieu ONR7, et ajouter 50 µL d'hexadécane C 16 H 34 .
Les souches sont ensuite ensemencées dans les 5 milieux et les tubes placés dans un bainmarie agitateur pendant 10 jours à 30°C. Un blanc est préparé pour être utilisé comme témoin
négatif et est soumis aux mêmes conditions. À la fin de l’incubation ; l'absorbance des
échantillons a été mesurée à une longueur d’onde de 600 nm à l'aide d'un spectrophotomètre
(UV-Visible JASCO V-730).
II.8 La croissance des bactéries sur différentes sources de carbone
Dans un tube à essai stérile, ensemencer 100 µL de suspension bactérienne dans 5 ml de
milieu ONR7a, puis ajouter 50 µL d'hydrocarbure (1% v/v). Dans cette étude, 4 sources de
carbone différentes ont été utilisées, deux composés aliphatiques étaient l'hexadécane et
l'octadécane, et les deux autres composés aromatiques étaient le benzène et le toluène.
Des blancs ont été préparés pour chaque source de carbone et les tubes ont été soumis aux
mêmes conditions. Les tubes ont ensuite été placés dans un bain-marie agitateur à une
température de 30°C pendant une semaine. A la fin de cette période, l’absorbance par rapport
au blanc est mesurée à l'aide d'un spectrophotomètre (UV-Vis JASCO V-730) à une longueur
d’onde de λ =600.
II.9 La croissance bactérienne sur différentes mesures des paramètres du pH et de la
température
Afin d'étudier la capacité des souches bactériennes à s’adapter aux différentes variations du
pH et de la température, différents milieux ONR7 ont été préparés en faisant varier les
valeurs du pH (4.5, 7.5 et 10.5) et de la température d’incubation (4, 20, 30 et 40 °C).
100 µL de chaque suspension bactérienne sont inoculées dans des tubes à essai contenant 5 ml
de milieu, 50 µL d'hexadécane C 16 H 34 sont additionnés ensemencer les souches dans 5
milieux. Les tubes sont placés dans un bain-marie agitateur pendant une semaine à 30°C pour
l’étude de la variation du pH et aux différentes températures (4, 20, 30 et 40 °C) pour l’étude
de la variation de la température.
Un blanc est préparé pour être utilisé comme témoin négatif et est soumis aux mêmes
conditions. Finalement L'absorbance des échantillons a été mesurée à une longueur d’onde de
λ = 600 nm à l'aide d'un spectrophotomètre (UV-Visible JASCO V-730).
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Isolement et caracterisation des bactéries degradants les différentes fractions du pétrol: Cas d’étude port de la Madrague, Ain Benian. - 51/92

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