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II.6.2 Drop collapse test
Test d'effondrement de goutte a été réalisé en ajoutant 7 μl de pétrole brute dans chaque puits
d'une plaque de microtitration à 96 puits. Le couvercle est équilibré 1 heure à température
ambiante, puis ajouter 20 μl de culture bactérienne de chaque isolat à surface pétrole. Après
une minute d'incubation, Si la goutte s'effondre, cela indique la présence de surfactant
(résultat positif); si elle reste perlée, ceci indique l'absence de tensioactif (réaction négative).
L'eau distillée stérile a utilisé comme contrôle négatif (Bodour et Miller-Maier 1998;
Mahjoubi et al., 2013
Figure 15. Schéma du test d’effondrement de la goutte (Djahnit,et al., 2019).
II.6.3 Test de déplacement
Mettre 20 ml d'eau distillée dans une boîte de Pétri vide (90 mm), 10 μl d'huile brute est
ajouté à la surface de l'eau pour former une fine couche d'huile à la surface. L'étape suivante
consiste à étaler 10 µl de la culture bactérienne à la surface de l'huile.
Mesurer le diamètre de la zone claire entourant la suspension bactérienne. Plus le diamètre est
grand, plus le rendement en biosurfactant est important (Cappello et al., 2016).
II.7 Test de l’halotolérance
Dans le but d'étudier la capacité des souches à s'adapter à différentes concentrations de
salinité, 5 milieux ONR7 ont été préparés en faisant varier les concentrations de NaCl de 10
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Isolement et caracterisation des bactéries degradants les différentes fractions du pétrol: Cas d’étude port de la Madrague, Ain Benian. - 50/92

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