Chapitre II
Matériel et méthodes
29
• Le calcul du nombre des microorganismes se fait par l’équation suivante :
N UFC/ml = c.10.1/d
N: nombre de microorganismes/ml de suspension.
í µí² : nombre de colonies comptées.
d: dilution de l’échantillon.
II.4. Evaluation de la résistance aux métaux lourds
Dans notre étude nous avons évalué la tolérance ou la résistance des bactéries à quatre métaux
lourds choisis selon leurs utilisations, disponibilités, toxicité et importance. Il s’agit du cuivre
(Cu), zinc (Zn), cadmium (Cd) et le mercure (Hg) avec des concentrations critiques finales
respectives de 400 µg/ml, 400 µg/ml, 200 µg/ml et 50 µg/ml. La préparation des boites à été
réalisée selon la méthode de dilution en milieu gélosé (Tergitol pour les coliformes et Mueller
Hinton pour la flore totale).
Technique :
- Mettre 2ml de chaque solution métallique dans une boite de Petri.
- Additionner 18 ml du milieu gélosé (Tergitol pour les coliforme et Mueller Hinton pour la
flore totale) dans les boites de Pétri pour obtenir les concentrations finales citées ci-dessus.
- Faire des mouvements circulaires et de va-et-vient on forme de 8 pour permettre à la
solution de se mélanger à la gélose utilisée. Laisser solidifier sur la paillasse.
- Des quantités de 0.1ml de chaque échantillon d’eau brute ou leurs dilution décimale
préparée (10
-1 ; 10 -2;10-3) on été étalé sur les boites de géloses préparées.
- Incuber à 37°c pendant 24h-48h.
- Dénombrement des bactéries résistantes à chaque métal.
La détermination des taux de résistance aux métaux lourds est appréciée par l’équation suivante :
% de résistance= Nombre de Bactérie résistance aux métaux lourds/Nombre de bactérie
en absence de métaux lourds*100
Matériel et méthodes
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• Le calcul du nombre des microorganismes se fait par l’équation suivante :
N UFC/ml = c.10.1/d
N: nombre de microorganismes/ml de suspension.
í µí² : nombre de colonies comptées.
d: dilution de l’échantillon.
II.4. Evaluation de la résistance aux métaux lourds
Dans notre étude nous avons évalué la tolérance ou la résistance des bactéries à quatre métaux
lourds choisis selon leurs utilisations, disponibilités, toxicité et importance. Il s’agit du cuivre
(Cu), zinc (Zn), cadmium (Cd) et le mercure (Hg) avec des concentrations critiques finales
respectives de 400 µg/ml, 400 µg/ml, 200 µg/ml et 50 µg/ml. La préparation des boites à été
réalisée selon la méthode de dilution en milieu gélosé (Tergitol pour les coliformes et Mueller
Hinton pour la flore totale).
Technique :
- Mettre 2ml de chaque solution métallique dans une boite de Petri.
- Additionner 18 ml du milieu gélosé (Tergitol pour les coliforme et Mueller Hinton pour la
flore totale) dans les boites de Pétri pour obtenir les concentrations finales citées ci-dessus.
- Faire des mouvements circulaires et de va-et-vient on forme de 8 pour permettre à la
solution de se mélanger à la gélose utilisée. Laisser solidifier sur la paillasse.
- Des quantités de 0.1ml de chaque échantillon d’eau brute ou leurs dilution décimale
préparée (10
-1 ; 10 -2;10-3) on été étalé sur les boites de géloses préparées.
- Incuber à 37°c pendant 24h-48h.
- Dénombrement des bactéries résistantes à chaque métal.
La détermination des taux de résistance aux métaux lourds est appréciée par l’équation suivante :
% de résistance= Nombre de Bactérie résistance aux métaux lourds/Nombre de bactérie
en absence de métaux lourds*100