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BIOCHIMIE GÉNÉRALE. LES CONSTITUANTS
protéines solides ajoutées à la solution,
La force ionique, la
le volume de la solution sont maintenus constants. Apres equ1hloratron
les phases solide et liquide, la solution, en
fonction des protéines
sohdes
dessine, au—dessous du point de saturation,
une ligne
drorte de pente xe
au—dessus du point de saturation dessme
une 11gne
de pente
0. La presenœ_
d’impureté modie la courbe, mais 5 p. 100 d impurete ne peuvent etre
détectés.
-
_
:
2) L’EXISTEN'CE D’UN INDIVIDUCI—HMIQUE UN_IQI_JE_à
lytique ou la chromatographie sur dextrane (qui distingue des_composes
a PM
diérent), à la chromatographie sur échangeur d’ions ou
zone (I’électrophorèse sur gel de polyacry1amide étant la plus sens1ble). -
_
3) LA CRISTALLISATÏON : ce critère en fait n’est ni nécessaire ni sufsant,
mais il est utile.
4) L’ACTIVITÉ
'SPÉCIFIQUB maximale s’il s’agit d’une enzyme
5) Les MÉTHODES IMMUNOLOGlQUES, en général plus résolutives que les
méthodes biochimiques, s0nt surtout employées en association avec
(immunochimie, immuno-e‘nzymologie). Nous donnerons un aperçu des
principales méthodes employées.
_
»
Rappelons
qu’on obtient des antisérums pour l’étude 1mmuno=
chimique pardes injections répétées de protéines antigéniques d’une
à des animaux d’autres espèces.
,
a) Détection et identication des antigènes et anticorps
,
:
Plusieurs tests_qualitatifs peuvent être utilisés. Les méthodes de
dans l’agar sont les plus employées : dans le système en double d1us10n,
_
’
antigènes et anticorps diñusent
—
J
5
_
“
f
à,travers une zone de gélose qui
',
-
«Antigene1—
.
,
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…
,
separe au debut. Lorsqu 11s migrent sur
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une surface plate, ils forment au
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de systèmes antigènes-anticorps, et aussi
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“
,
les relations entre les divers antigènes,
Antigèn‘e_4o
,
‘
-
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Les Systèmes les plus utilisés sont ceux
de Oudinet de Ouchterlony. Dansœ
Pro. 43L —— Méthode ‘d’oùtcherlony_ ‘ dernier cas, une boîte de Petri est
-
…f
' 5
de
tamponné. Les proteles
antigéniques:etl’antisérum contenat-les- anticorps à étudier
dans
des
puits » circulaires. On les laisse d1ffuSer24 heures ou plus ,onV01t
(dél,prëfêïêñçèàns un champ
des protemes
L9rsquîun
centre… une protéine ant1g©nlqæ
.
-
2011 peut en faire la preuve pan—leur; réaC‘ti0m d’« identité, totale»
,
avec la
‘
Lorsquelesde“thesf0rmth un « éperon »,
<< 1denüte
-
‘
7
°thaltüSSUÏaeœlaSlgmequelapreparaüonprotelquenetaltpasvralment
Amut0nsquelorsquelesprotemesams1tesœessontdesenzymesonpeut
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souvent°°10rersPwqüem€mParunereaCt10nenzymatlquecoupleeavec
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BIOCHIMIE GÉNÉRALE. LES CONSTITUANTS
protéines solides ajoutées à la solution,
La force ionique, la
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mais il est utile.
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5) Les MÉTHODES IMMUNOLOGlQUES, en général plus résolutives que les
méthodes biochimiques, s0nt surtout employées en association avec
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principales méthodes employées.
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qu’on obtient des antisérums pour l’étude 1mmuno=
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a) Détection et identication des antigènes et anticorps
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tamponné. Les proteles
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