BUTS ET MÉTHODES DE LA BIOGHIMÏE GÉNÉRALE
23
avoir une épaisseur inférieure à 0,4…mm pour permettre un temps de diusion
des gaz sufsamment court. Un grand thermostat contient des chambres
respiratoires, chacune connectée à un manomètre. Dans le compartiment
principal (6), on place la coupe ou lé broyat de tissu ; le compartimentcen—
tral peut contenir un petit morceau de papier ltre (5) imprégné d’un réactif
pouvant absorber le gaz carbonique dégagé; l’oxygène consommé diminue
‘
la pression dans la chambre de sorte que le liquide manomètriqüé dela branChe
,
droite du capillaire (l) monte : on apprécie ”ainsi des variations. de 1 m3.
‘.
Le diverticule latéral (3) permet l’adjonction à un moméntdonné‘ (2) d’un
réactif choisi (4).
'
Les broyuts de tissus sont obtenus, après découpage aux ciseaux, par
passage au broyeur de Latapie, ou par un horhogénéiseur de Potter et Elvejhem,
ou par un broyeur ménager type « Waring—Blendor », ou par pulvérisatioaprès
congélation à l’air, l’azote liquide ou la neige carbonique ou par traitement
aux ultra-sons.
ï
”
‘5° La culture des tissus a pris son développement dès le début de c'esiècle :
celle des tissus des mammifères est due à Carrel;'on peut faire croître un
.
»
fragment de tissu et analyser un de ses métabolites ou bien‘gle tissu se disperse
en cellules isolées dont on peùt‘appféÇief
‘
j
,
_
6° La fusion cellulaire (Barski) est la__nse en commun des membranes
plasmiques de deux ou plusieurs cellules, aboutissant …Ê1_.1_3- constitution d’un
polycaryon.
est le résultat
:"àdhére‘næ inter-cellulaire,
établissement d’un contact direct entre les membranes plasmiques_ de deux ou
plusieurs cellules, disparition de ces membranes à leur point de contact, réta—
blissement de la continuité entredeux membranes .plasmiques d’Origine cellulaire différente.
-
,
.
…
7° L’isoleme'nt des constituants Cellulaires s’effectue sur des cellules broyées
.
à basse température dans un hontogénéiseur (g. 14) (Potter et Elvéhjem
ou Bounce), constitué d’un tube épais où pénètre un piston rode Soumis à des
mouvements de.rotation. On effectue ainsi dans un liquide convenable une
mise en suspension des ,con‘stitùant—S subcellulaires et leur centrifugation dans
un
centrifugeur refroidi permet de séparer les noyaux " qui sédi'mentent
facilement à 200 g, puis “les mitochondries, puis les
microsomes (visibles
seulement au miér05copefélectronique) qui réélame‘t une ultracentrifugatio
prolbngée à 100 000 g, un surnageant qui—"contient les constituants solubles.
,
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avoir une épaisseur inférieure à 0,4…mm pour permettre un temps de diusion
des gaz sufsamment court. Un grand thermostat contient des chambres
respiratoires, chacune connectée à un manomètre. Dans le compartiment
principal (6), on place la coupe ou lé broyat de tissu ; le compartimentcen—
tral peut contenir un petit morceau de papier ltre (5) imprégné d’un réactif
pouvant absorber le gaz carbonique dégagé; l’oxygène consommé diminue
‘
la pression dans la chambre de sorte que le liquide manomètriqüé dela branChe
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droite du capillaire (l) monte : on apprécie ”ainsi des variations. de 1 m3.
‘.
Le diverticule latéral (3) permet l’adjonction à un moméntdonné‘ (2) d’un
réactif choisi (4).
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Les broyuts de tissus sont obtenus, après découpage aux ciseaux, par
passage au broyeur de Latapie, ou par un horhogénéiseur de Potter et Elvejhem,
ou par un broyeur ménager type « Waring—Blendor », ou par pulvérisatioaprès
congélation à l’air, l’azote liquide ou la neige carbonique ou par traitement
aux ultra-sons.
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celle des tissus des mammifères est due à Carrel;'on peut faire croître un
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en cellules isolées dont on peùt‘appféÇief
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plasmiques de deux ou plusieurs cellules, aboutissant …Ê1_.1_3- constitution d’un
polycaryon.
est le résultat
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établissement d’un contact direct entre les membranes plasmiques_ de deux ou
plusieurs cellules, disparition de ces membranes à leur point de contact, réta—
blissement de la continuité entredeux membranes .plasmiques d’Origine cellulaire différente.
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7° L’isoleme'nt des constituants Cellulaires s’effectue sur des cellules broyées
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à basse température dans un hontogénéiseur (g. 14) (Potter et Elvéhjem
ou Bounce), constitué d’un tube épais où pénètre un piston rode Soumis à des
mouvements de.rotation. On effectue ainsi dans un liquide convenable une
mise en suspension des ,con‘stitùant—S subcellulaires et leur centrifugation dans
un
centrifugeur refroidi permet de séparer les noyaux " qui sédi'mentent
facilement à 200 g, puis “les mitochondries, puis les
microsomes (visibles
seulement au miér05copefélectronique) qui réélame‘t une ultracentrifugatio
prolbngée à 100 000 g, un surnageant qui—"contient les constituants solubles.
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