l—Hydrolyse :
2 voies
'
(a)— voie chimique par les acides forts et à chaud; En général on
utilise
HCI 6N à lZO°Ç pendant 10 à 24h en anpcule
scellée sous vide ou
sous N2.
C‘est la méthode la plus utilisée.
Inconvénients de cette hydrolyse E
î
.Gln et
et Asp + NHS
.5
Le dosage de NH3
formé au cours de l'hydrolyse
acide penmet l'esti—
nation de Gln et Asn.
'
.
Set et Thr sont partiellenænt
.
'
.
Trp totalement détruit.
'
_Le dosage_de Îrp nécessite une hydrolyse alcaline (NaOH 2à AN pendant
A à 8h à 100°).
.
Ce nwde d'hydrolyse ne peut être valable pour l‘étude des autres Aa
_
z
,
_
'
car
il y & racemîsation
de tous les Aa et destruction Cys, 5er et Thr.
(b)—voie enzynatique par des peptidases bactériennes ou par des en—
dapeptidases (trypsine)è
-
.
Cette hydrolyse est lente, longue,rarement conplète. La spécificité
des enzynæs est telle qu'elle nécessite l'ençloi d'un
il y
aura des dégradations
soit—par autolyse soit par a;tion des autres enzynæs
sur
les protéines
_
et
identification des Aa centenuSdans l'hydrolysat:
C'est l'analyse Qualitaiive du
_
.
'_
_
Plusieurs nëthodes biochinüques sont disponibles pour effectuer
cette analyse qualitative telle que :
ala chronatogïaphie de partage
-
_
b» la chronatographie par échange d'ions
ï
c—
i‘électrophorèse
-
'
.
!
a43hromatggraphies :
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