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5 • Techniques et biotechnologies
Figure 48 Confection d’une banque d’ADN
en utilisant des phages comme vecteurs.
Le phage contient l’ADN d’intérêt et va infecter les bactéries,
puis s’y multiplier et en se multipliant les lyser. Les bactéries
sont étalées sur des boîtes de gélose, les plages claires indiquent la lyse bactérienne. On effectue ensuite un transfert
des ADN sur des membranes. La banque ainsi établie devra
ensuite être criblée, ce qui sera fait ici au moyen d’une sonde
homologue chaude. Le spot radioactif sera prélevé avec une
spatule puis réintroduit dans de bactéries pour y être amplifié.