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Partie 3 • Autres méthodes
Le lecteur pourra retrouver les deux expressions approchées 16.21 et 16.22, utilisées pour
calculer les intensités des pics M + 1 et M + 2 des composés ne comportant que les éléments
C, H, N, O, F, P (nC, nN, etc. symbolisent le nombre d’atomes de carbone, d’azote, etc.) :
(M + 1)% = 1,1 nC + 0,36 nN
(16.21)
(M + 2)% = nC(nC − 1) × 1,12/200 + 0,2 nO
(16.22)
Cette méthode est devenue courante d’emploi mais son efficacité est assez limitée.
16.14.3 Recherche de la masse moléculaire à partir des ions polychargés
Des ions polychargés sont obtenus à partir des macromolécules lorsqu’elles sont ionisées en
faisant appel aux sprays (ESI, APCI). Il est possible d’accéder à leurs masses moléculaires
par une méthode alternative au procédé indiqué dans la figure 16.24. Pour faire ce calcul on
doit disposer d’un spectre brut présentant une succession de pics moléculaires qui différent
par le nombre de charges portées.
On repère sur l’enregistrement du composé dont la masse est désignée par M, 2 pics
consécutifs M 1 et M 2 . Leurs charges globales z 1 et z 2 diffèrent donc d’une unité : z 2 = z 1 −1
(fig. 16.27). On peut donc écrire les relations 16.23 et 16.24 :
M 1 =
M
z 1
(16.23)
M 2 =
M
z 2
(16.24)
Un calcul simple permet de déduire pour z 1 :
z 1 =
M 2
M 2 − M 1
(16.25)
Ensuite connaissant z 1 (arrondi à l’entier le plus proche) on calculera M (Da) à partir de
16.23.
2000
2600
m/z
2800
3000
2400
2200
48+
58+
49+
59+
50+
60+
55+
72+
53+
70+
51+
56+
66+
52+
62+
54+
64+
57+
68+
M 1
M 2
z 2
z 1
Figure 16.27 Spectre profil d’un anticorps de masse moléculaire élevée.
Ce spectre a été obtenu par électrospray. Sans utiliser les valeurs des charges reportées
au-dessus de chaque signal, le calcul décrit dans le texte conduit à partir des seules
valeurs de M 1 = 2 680 et de M 2 = 2 729 à M = 150 080 Da.
Partie 3 • Autres méthodes
Le lecteur pourra retrouver les deux expressions approchées 16.21 et 16.22, utilisées pour
calculer les intensités des pics M + 1 et M + 2 des composés ne comportant que les éléments
C, H, N, O, F, P (nC, nN, etc. symbolisent le nombre d’atomes de carbone, d’azote, etc.) :
(M + 1)% = 1,1 nC + 0,36 nN
(16.21)
(M + 2)% = nC(nC − 1) × 1,12/200 + 0,2 nO
(16.22)
Cette méthode est devenue courante d’emploi mais son efficacité est assez limitée.
16.14.3 Recherche de la masse moléculaire à partir des ions polychargés
Des ions polychargés sont obtenus à partir des macromolécules lorsqu’elles sont ionisées en
faisant appel aux sprays (ESI, APCI). Il est possible d’accéder à leurs masses moléculaires
par une méthode alternative au procédé indiqué dans la figure 16.24. Pour faire ce calcul on
doit disposer d’un spectre brut présentant une succession de pics moléculaires qui différent
par le nombre de charges portées.
On repère sur l’enregistrement du composé dont la masse est désignée par M, 2 pics
consécutifs M 1 et M 2 . Leurs charges globales z 1 et z 2 diffèrent donc d’une unité : z 2 = z 1 −1
(fig. 16.27). On peut donc écrire les relations 16.23 et 16.24 :
M 1 =
M
z 1
(16.23)
M 2 =
M
z 2
(16.24)
Un calcul simple permet de déduire pour z 1 :
z 1 =
M 2
M 2 − M 1
(16.25)
Ensuite connaissant z 1 (arrondi à l’entier le plus proche) on calculera M (Da) à partir de
16.23.
2000
2600
m/z
2800
3000
2400
2200
48+
58+
49+
59+
50+
60+
55+
72+
53+
70+
51+
56+
66+
52+
62+
54+
64+
57+
68+
M 1
M 2
z 2
z 1
Figure 16.27 Spectre profil d’un anticorps de masse moléculaire élevée.
Ce spectre a été obtenu par électrospray. Sans utiliser les valeurs des charges reportées
au-dessus de chaque signal, le calcul décrit dans le texte conduit à partir des seules
valeurs de M 1 = 2 680 et de M 2 = 2 729 à M = 150 080 Da.