1 • Chromatographie, aspects généraux
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1.7 GRANDEURS DE RÉTENTION
1.7.1 Temps de rétention
La définition du temps de rétention a été précédemment donnée dans le paragraphe 1.2.
1.7.2 Volume d’élution ou volume de rétention V R
Le volume d’élution (de rétention) V R de chaque soluté représente le volume de phase
mobile nécessaire pour le faire migrer d’une extrémité à l’autre de la colonne. Il correspond
sur le chromatogramme au volume de la phase mobile qui s’est écoulé entre l’instant de
l’injection et celui correspondant au maximum du pic. Si le débit D est stationnaire,
V R = t R ·D
(1.16)
Volume d’un pic, V pic . Il correspond au volume de phase mobile dans lequel le composé
est dilué en sortie de colonne. Il vaut par définition :
V pic = v·D
(1.17)
1.7.3 Volume de la phase mobile dans la colonne (volume mort V M )
Le volume de la phase mobile dans la colonne (encore appelé volume mort) V M correspond au volume interstitiel accessible. Il peut être calculé d’après le chromatogramme, à
condition d’introduire un soluté non retenu par la phase stationnaire. On peut l’exprimer en
fonction de t M et du débit D :
V M = t M ·D
(1.18)
1.7.4 Volume de la phase stationnaire
Ce volume désigné par V S n’apparaît pas sur le chromatogramme. Dans les cas simples on
le calcule en retranchant du volume total interne de la colonne vide le volume de la phase
mobile.
1.7.5 Facteur de rétention k (ou de capacité)
Quand un composé de masse totale m T est introduit dans la colonne, il se répartit en deux
quantités : m M dans la phase mobile et m S dans la phase stationnaire. Si on ne change pas
les conditions opératoires, ces deux quantités demeurent constantes au cours de sa migration
dans la colonne. Leur rapport, appelé facteur de rétention, est indépendant de m T :
k =
m S
m M
=
C S · V S
C M · V M
= K
V S
V M
(1.19)
Le facteur de rétention, encore appelé facteur de capacité k, est un paramètre très important de la chromatographie. Il est défini en régime isocratique. Ce n’est pas une constante,
bien qu’il ne varie pas avec le débit ou la longueur de la colonne, car il dépend des conditions opératoires. Pour cette raison il est quelque fois désigné par k
au lieu de k.
Ce paramètre rend compte de la faculté plus ou moins grande de la colonne à retenir
chaque composé (capacité). Dans la mise au point des séparations on fait en sorte que k ne
dépasse pas 10, afin de ne pas trop allonger le temps de passage des composés.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit
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1.7 GRANDEURS DE RÉTENTION
1.7.1 Temps de rétention
La définition du temps de rétention a été précédemment donnée dans le paragraphe 1.2.
1.7.2 Volume d’élution ou volume de rétention V R
Le volume d’élution (de rétention) V R de chaque soluté représente le volume de phase
mobile nécessaire pour le faire migrer d’une extrémité à l’autre de la colonne. Il correspond
sur le chromatogramme au volume de la phase mobile qui s’est écoulé entre l’instant de
l’injection et celui correspondant au maximum du pic. Si le débit D est stationnaire,
V R = t R ·D
(1.16)
Volume d’un pic, V pic . Il correspond au volume de phase mobile dans lequel le composé
est dilué en sortie de colonne. Il vaut par définition :
V pic = v·D
(1.17)
1.7.3 Volume de la phase mobile dans la colonne (volume mort V M )
Le volume de la phase mobile dans la colonne (encore appelé volume mort) V M correspond au volume interstitiel accessible. Il peut être calculé d’après le chromatogramme, à
condition d’introduire un soluté non retenu par la phase stationnaire. On peut l’exprimer en
fonction de t M et du débit D :
V M = t M ·D
(1.18)
1.7.4 Volume de la phase stationnaire
Ce volume désigné par V S n’apparaît pas sur le chromatogramme. Dans les cas simples on
le calcule en retranchant du volume total interne de la colonne vide le volume de la phase
mobile.
1.7.5 Facteur de rétention k (ou de capacité)
Quand un composé de masse totale m T est introduit dans la colonne, il se répartit en deux
quantités : m M dans la phase mobile et m S dans la phase stationnaire. Si on ne change pas
les conditions opératoires, ces deux quantités demeurent constantes au cours de sa migration
dans la colonne. Leur rapport, appelé facteur de rétention, est indépendant de m T :
k =
m S
m M
=
C S · V S
C M · V M
= K
V S
V M
(1.19)
Le facteur de rétention, encore appelé facteur de capacité k, est un paramètre très important de la chromatographie. Il est défini en régime isocratique. Ce n’est pas une constante,
bien qu’il ne varie pas avec le débit ou la longueur de la colonne, car il dépend des conditions opératoires. Pour cette raison il est quelque fois désigné par k
au lieu de k.
Ce paramètre rend compte de la faculté plus ou moins grande de la colonne à retenir
chaque composé (capacité). Dans la mise au point des séparations on fait en sorte que k ne
dépasse pas 10, afin de ne pas trop allonger le temps de passage des composés.
© Dunod – La photocopie non autorisée est un délit