Chapitre 3
Matériels et Méthodes
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2. Vibrions :
 Enrichissement :
Le milieu d’enrichissement des vibrions est l’eau peptonée alcaline (EPA) 10 fois
concentrée. Au 50ml d’EPA, on ajoute 450ml d’eau de mer puis l’incubation se fait à 37°C
pendant 24 à 48 heures.
Figure 20 : Technique d’enrichissement des vibrions dans l’eau.
 Isolement :
A partir du milieu d’enrichissement on procède à l’étalement d’une goutte prélevée
à la surface du flacon d’EPA sur milieu Thiosulfate, Citrate, Bile, Saccharose (TCBS),
l’incubation est faite à 37°C pendant 18 à 24 heures.
 Lecture :
Les colonies apparaissent en :
­ Petites colonies Vertes claire.
­ Colonies jaune brunes avec virage du milieu vers l’orange (reduction du saccharose):
vibrio cholera.
­ Colonies jaunes translucides de grande taille.
­ Colonies incolore au centre vert : vibrio parahaemolyticus.
­ Colonies orange saumon.
­ Colonies marron de grande taille.
­ Colonies orange bombées, d’autre sont transparentes.
50 ml d’EPA
450 ml de l’eau
de mer
Homogénéisation
Incubation à
37 °C
pendant 24 à
48 heures.
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