Chapitre 3
Matériels et Méthodes
45
Dosage de l’ammonium :
Le dosage de l’ammonium (NH 4
+ ) est réalisé suivant la méthode de Koroleff (1969)
(in Aminot et Chausse-Pied, 1983).
En milieu alcalin (8 < pH < 11,5), l’ammonium dissous réagit sur l’hypochlorite pour former
une monochloramine.
Ce composé, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant)
donne lieu à la formation d’un bleu d’indophénol. La réaction est catalysée
par le nitroprussiate de sodium. Le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde
de 630 nm.
Dosage des nitrites :
Les nitrites (N0 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide
en
milieu acide pH<2. Ce composé formera ensuite en présence
de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de couleur rose absorbant la lumière
à 540 nm (Benschneider et Robinson, 1952 et Skalar, 1998).
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylènediamine (NED)
Figure 17 : Réactifs de Griess pour le dosage des nitrites.
Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (N0 3
-
) en nitrites (N0 2
-
) par passage
de l’échantillon sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al, 1967).
Les nitrites (en réalité NO 2
- + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon
la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration
des nitrites déterminés directement (sans passage de
l’échantillon sur la colonne
réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
Dosage des Orthophosphates :
En présence d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40° C (bain -
marie), les ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour
former un complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide
ascorbique (Murphy et Riley, 1962). Cette forme réduite de coloration bleue
a un maximum d’absorption à 880 nm.
Étalonnage :
Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis une solution
fille pour chaque élément à analyser (voir annexe 9).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant
les concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.
Matériels et Méthodes
45
Dosage de l’ammonium :
Le dosage de l’ammonium (NH 4
+ ) est réalisé suivant la méthode de Koroleff (1969)
(in Aminot et Chausse-Pied, 1983).
En milieu alcalin (8 < pH < 11,5), l’ammonium dissous réagit sur l’hypochlorite pour former
une monochloramine.
Ce composé, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant)
donne lieu à la formation d’un bleu d’indophénol. La réaction est catalysée
par le nitroprussiate de sodium. Le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde
de 630 nm.
Dosage des nitrites :
Les nitrites (N0 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide
en
milieu acide pH<2. Ce composé formera ensuite en présence
de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de couleur rose absorbant la lumière
à 540 nm (Benschneider et Robinson, 1952 et Skalar, 1998).
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylènediamine (NED)
Figure 17 : Réactifs de Griess pour le dosage des nitrites.
Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (N0 3
-
) en nitrites (N0 2
-
) par passage
de l’échantillon sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al, 1967).
Les nitrites (en réalité NO 2
- + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon
la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration
des nitrites déterminés directement (sans passage de
l’échantillon sur la colonne
réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
Dosage des Orthophosphates :
En présence d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40° C (bain -
marie), les ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour
former un complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide
ascorbique (Murphy et Riley, 1962). Cette forme réduite de coloration bleue
a un maximum d’absorption à 880 nm.
Étalonnage :
Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis une solution
fille pour chaque élément à analyser (voir annexe 9).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant
les concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.