_____________________________ CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES
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nauplii sous microscope optique (G×4)(BRUGGMAN et al., 1980) Le calcul de l’efficacité
d’éclosion (EE) a été réalisé selon la formule suivante :
Où :
N : nombre de nauplius observé
V : volume d’incubation
v : volume de l’échantillon prélevé pour le comptage = 0.25ml
C : quantité des cystes incubés (g)
II-1-4- Détermination de la qualité microbiologique de l’eau d’élevage après éclosion
Après éclosion des cystes, placer 1ml de chaque solution mère (milieu d’élevage additionnée
ou non par une souche probiotique) dans des tubes de 9ml d’eau physiologique stérile pour
l’obtention d’une dilution de 10
-1
, puis répéter l’opération jusqu’à atteindre la dilution 10
-6 .
Un volume de 0.1ml de chaque solution mère et dilution sera ensemencé sur une boite de
gélose de Mac conckey et incubé à 37°C pendant 48h, dans le but de dénombrer les bactéries
à Gram négatif et sur les boites de gélose de TCBS incubée à 22°C pendant 48h à 72h pour le
dénombrement des Vibrio et germes apparentés (VILLAMIL et al, 2003).
Après le dénombrement sur les deux milieux de culture, les colonies dominantes ont été
sélectionnées visuellement à la base de leur apparence et leur abondance. Elles ont été
purifiées et conservées. Quelques une d’entres elles ont été identifiées par coloration de Gram
et quelques tests biochimiques (oxydase, catalase, et galerie API 20E).
Figure II-2 : L’ensemencement de l’eau d’élevage d’Artémia.spaprès l’éclosion sur
Mac conkey et TCBS
EE= (N×V)/ (v×C)