Chapitre II : Matériels et méthodes
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Figure 11: Préparation du milieu de culture (gélose lactosée base T.T.C Tergitol 7)
(Benmokhtar, 2016).
D. Préparation des dilutions :
Pour diminuer le nombre des micro-organismes par unité de volume on effectue des dilutions pour
la solutioo
e de l’’’haatillon :
 Travailler dans la zone stérile du bec Bunsen.
 PPPpaaee suu uu pootoii le ooooe de tuue ooteeaat
l d’eau phhsiologiiue stttile
correspondant au nombre de dilutions choisies.
 Agitee soiggeuseeeet le flaaoo ooteeaat l’’’haatilloo pouu avoii une répartition homogène
des micro-organismes.
 Pipetee stttileeeet
l d’’’haatilloo avee uue pipette pasteuu stttile, et l’ittoduiie daas uu
tuue à essai de
l d’eau phhsiologiiue stttile, oo ootieet uue dilutioo ui oespood à ⁄
ue l’oo peut ssmboliser 10
-1 .
 Jetee la pipette daas uu aa ooteeaat de l’eau de javel.
 Avec une nouvelle pipette, transférer 1ml de cette première dilution homogénéisée dans un
second tube et procéder comme pour la première dilution, on obtient une dilution qui
corespood à ⁄
ue l’oo peut ssssolisee
-2
.
 Cotiuee aiisi jussu’à la dilutioo ddsiiie.
E. Filtration sur membrane et incubation :
 Stériliser la surface supérieure de la rampe de filtration ainsi que la plaque poreuse (en ouvrant
le robinet pour aspirer la flamme).