Chapitre II
matériels et méthodes
39
o . Identification biochimique par API 20 E
L’identification biochimique par les galeries API20E a été réalisée pour confirmer
l’identification d’E.coli et Salmonella.
Principe
C’est un système d’identification des entérobactéries et d’autres bacilles à Gram négatif, il
comporte 20 tests biochimiques standardisés et miniaturisés qui sont inoculés avec une
suspension bactérienne qui reconstitue le milieu. Les réactions produites pendant la période
d’incubation se traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés par l’addition de
réactif (Biomérieux).
Technique
Réunir fond et couvercle d’une boite d’incubation et répartir environ 5ml d’eau distillée dans
les alvéoles pour crée une atmosphère humide.
Retirer la galerie de son emballage individuel et la déposer dans la boite d’incubation.
Préparer l’inoculum bactérien : prélever 1 à 3 colonies dans de l’eau physiologique stérile.
Inoculer la galerie comme suit :
Remplir à l’aide d’une micropipette les tubes et cupules des tests CIT, VP, GEL.
Remplir uniquement les tubes des autres tests.
Créer une anaérobiose dans les tests : ADH, LDC, ODC, URE, H2S en remplissant leur
capsule d’huile de vaseline.
Refermer la boite d’incubation et incuber à 37° C pendant 24 heures.
Lecture
Ces galeries API20E sont lues selon les indications du fournisseur. Après codification des
réactions en un profil numérique, on se réfère à un catalogue analytique où l’identification est
donnée avec un pourcentage et une appréciation.
Remplir de suspension le tube et la cupule de CIT, VP, GEL
Créer une anaérobiose dans les tests : ADH, LDC, ODC, URE, H2S
en remplissant leur capsule d’huile de vaseline.
Figure n° 20: Identification biochimique par les galeries API 20E.
matériels et méthodes
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o . Identification biochimique par API 20 E
L’identification biochimique par les galeries API20E a été réalisée pour confirmer
l’identification d’E.coli et Salmonella.
Principe
C’est un système d’identification des entérobactéries et d’autres bacilles à Gram négatif, il
comporte 20 tests biochimiques standardisés et miniaturisés qui sont inoculés avec une
suspension bactérienne qui reconstitue le milieu. Les réactions produites pendant la période
d’incubation se traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés par l’addition de
réactif (Biomérieux).
Technique
Réunir fond et couvercle d’une boite d’incubation et répartir environ 5ml d’eau distillée dans
les alvéoles pour crée une atmosphère humide.
Retirer la galerie de son emballage individuel et la déposer dans la boite d’incubation.
Préparer l’inoculum bactérien : prélever 1 à 3 colonies dans de l’eau physiologique stérile.
Inoculer la galerie comme suit :
Remplir à l’aide d’une micropipette les tubes et cupules des tests CIT, VP, GEL.
Remplir uniquement les tubes des autres tests.
Créer une anaérobiose dans les tests : ADH, LDC, ODC, URE, H2S en remplissant leur
capsule d’huile de vaseline.
Refermer la boite d’incubation et incuber à 37° C pendant 24 heures.
Lecture
Ces galeries API20E sont lues selon les indications du fournisseur. Après codification des
réactions en un profil numérique, on se réfère à un catalogue analytique où l’identification est
donnée avec un pourcentage et une appréciation.
Remplir de suspension le tube et la cupule de CIT, VP, GEL
Créer une anaérobiose dans les tests : ADH, LDC, ODC, URE, H2S
en remplissant leur capsule d’huile de vaseline.
Figure n° 20: Identification biochimique par les galeries API 20E.