Chapitre II
matériels et méthodes
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2.4.3. Recherche des germes pathogènes : Salmonelles
Salmonella est le seul pathogène recherché en routine. Cette recherche est effectuée par la
méthode qualitative réalisée en trois étapes :
 Pré- enrichissement ;
 Enrichissement ;
 Isolement.
a. Pré-enrichissement
Ajouter 100 ml d’échantillon à 100ml d’eau peptonée tamponnée (EPT), puis incuber à 37° C
pendant 18h.
b. Enrichissement
À partir de la culture précédente on transfère simultanément :
 10 ml dans un tube de bouillon au sélénite-cystine (SFB) double concentré additionné de 2
disques de l’additif SFB.
 1 ml dans un tube de bouillon au sélénite-cystine (SFB) simple concentré additionné d’un
disque de l’additif SFB.
Incubation à 37 ° C pendant 16 heures.
c. Isolement
A partir des milieux d’enrichissement (SFB simple et double concentré), un isolement sur une
gélose d’Hecktoen est réalisé. Les Salmonelles ne fermentant pas ni le lactose ni le saccharose
vont apparaître sous forme de colonies bleu vert avec ou sans centre noir.
La suspicion de la présence des Salmonelles doit être confirmée par des tests biochimiques et
galerie API20E.