Chapitre II : Méthode d’identification
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 du poids moléculaire et des différentes interactions que la protéine peut avoir avec
son solvant.
Depuis son application pratique en génétique , l’électrophorèse enzymatique est largement
employée par ce que représentant un coût financier plus faible, un protocole ayant peu de
contraintes permettant d’analyser rapidement et en même temps un nombre important
d’individus.
Principe des électrophorèses de protéines sur gel de polyacrylamide :
Focalisation isoélectrique
La focalisation isoélectrique (IEF) est une technique d’électrophorèse sur gel qui
sépare les protéines selon leurs points isoélectriques (pI) dans un gradient de pH. Le point
isoélectrique d’une protéine est le pH pour lequel la charge nette de la protéine est nulle. Les
protéines, entraînées par un champ électrique, vont se déplacer dans ce gradient en fonction
de leur charge nette. Quand une protéine arrive au point de pH qui correspond à son point
isoélectrique, sa charge globale devient nulle résultant en un arrêt de sa migration : on parle
de focalisation isoélectrique (Ballihaut, 2007)(figure 6).
Figure 6 : principe de la focalisation isoéléctrique des protéines(Ballihaut, 2007).
Après application d’une tension les protéines migrent dans le gradient de Ph et se focalisent
au point de Ph correspondant à leur pI .
l'électrofocalisation fractionnement isoélectrique, va modifier quelque peu ce principe
fondamental. Les protéines ne migreront plus dans un milieu conducteur de pH fixe mais dans
un gradient de PH où elles se sépareront d'après leur point isoélectrique PI.