Chapitre II : Méthode d’identification
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• la résistance du champ,
• la taille et la forme des molécules,
• l’hydrophobicité relative des échantillons,
• la force ionique et la température du tampon dans lequel les molécules se déplacent.
Figure 5 : Principe de l’électrophorèse.
(http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/lafont/electrophorese/E1.html)
2.1.3 Electrophorèse des protéines :
L’électrophorèse convient tout particulièrement au fractionnement des protéines, étant
donné que leurs molécules possèdent le poids moléculaire requis (supérieur à 10.000).
On obtient ainsi une répartition des protéines par bandes qui peuvent être mises en évidence.
(Protz, 1983).
Comme milieu de séparation, on utilise souvent des gels de nature poreuse (Barril,et
al., 2012), les gels polyacrylamide fournissent des résolutions plus élevées que les gels d'agar
et d'amidon et permettent une meilleure analyse des résultats de la séparation.
Le principe de cette méthode repose donc sur le caractère amphotère des protéines.
L’ionisation porte sur les groupements terminaux acide ou basique (NH3+, COO- et
groupements imidazole) des résidus aminés qui déterminent la charge nette de la protéine
ainsi que les racines
La vitesse de migration de la protéine à l’intérieur du support ( gel d’amidon ou de
polyacrylamide) dépend de :
la charge nette à un pH donné.
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• la résistance du champ,
• la taille et la forme des molécules,
• l’hydrophobicité relative des échantillons,
• la force ionique et la température du tampon dans lequel les molécules se déplacent.
Figure 5 : Principe de l’électrophorèse.
(http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/lafont/electrophorese/E1.html)
2.1.3 Electrophorèse des protéines :
L’électrophorèse convient tout particulièrement au fractionnement des protéines, étant
donné que leurs molécules possèdent le poids moléculaire requis (supérieur à 10.000).
On obtient ainsi une répartition des protéines par bandes qui peuvent être mises en évidence.
(Protz, 1983).
Comme milieu de séparation, on utilise souvent des gels de nature poreuse (Barril,et
al., 2012), les gels polyacrylamide fournissent des résolutions plus élevées que les gels d'agar
et d'amidon et permettent une meilleure analyse des résultats de la séparation.
Le principe de cette méthode repose donc sur le caractère amphotère des protéines.
L’ionisation porte sur les groupements terminaux acide ou basique (NH3+, COO- et
groupements imidazole) des résidus aminés qui déterminent la charge nette de la protéine
ainsi que les racines
La vitesse de migration de la protéine à l’intérieur du support ( gel d’amidon ou de
polyacrylamide) dépend de :
la charge nette à un pH donné.