Chapitre II
Matériels et méthodes
35
2.5.2.3. Technique de recherche des Salmonelles
La recherche des salmonelles se fait par la méthode qualitative réalisée en 03
étapes successives: pré enrichissement, enrichissement, l’isolement, et l’identification
biochimique (RODIER et al., 2005).
o Pré enrichissement : ensemencement du milieu liquide (eau peptonée tamponnée) :
filtrer un volume de 100 ml de l’eau de mer sur une membrane filtrante de 0.45µm de
porosité,
déposer Le filtre dans un flacon contenant 100 ml d’eau peptonée tamponnée
incuber a à 37° C pendant 18 heures.
o Enrichissement : cette étape consiste en l’ensemencement du milieu sélectif SFB à partir
du bouillon de pré enrichissement puis incubation à 37°c pendant 16 heures.
o L’isolement : ensemencement du milieu sélectif solide Hektoen à partir du bouillon
d’enrichissement ; l’incubation se fait à 37° C pendant 24 heures. Les colonies verte avec
ou sans centre noire sont présomptives de la présence de Salmonella. La confirmation de
l’identification doit se faire sur galerie API20E.
Matériels et méthodes
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2.5.2.3. Technique de recherche des Salmonelles
La recherche des salmonelles se fait par la méthode qualitative réalisée en 03
étapes successives: pré enrichissement, enrichissement, l’isolement, et l’identification
biochimique (RODIER et al., 2005).
o Pré enrichissement : ensemencement du milieu liquide (eau peptonée tamponnée) :
filtrer un volume de 100 ml de l’eau de mer sur une membrane filtrante de 0.45µm de
porosité,
déposer Le filtre dans un flacon contenant 100 ml d’eau peptonée tamponnée
incuber a à 37° C pendant 18 heures.
o Enrichissement : cette étape consiste en l’ensemencement du milieu sélectif SFB à partir
du bouillon de pré enrichissement puis incubation à 37°c pendant 16 heures.
o L’isolement : ensemencement du milieu sélectif solide Hektoen à partir du bouillon
d’enrichissement ; l’incubation se fait à 37° C pendant 24 heures. Les colonies verte avec
ou sans centre noire sont présomptives de la présence de Salmonella. La confirmation de
l’identification doit se faire sur galerie API20E.
