Chapitre II
Matériels et méthodes
31
2.4.3. Dosage de la chlorophylle
La présence de phytoplancton dans l’eau est estimée par la mesure de la chlorophylle
(RODIER et al., 1997).
Principe de la méthode (Méthode Spectrophotométrique)
Après filtration d'un certain volume d'eau de mer pour concentrer le matériel particulaire, le
filtre est immergé dans un solvant qui assure l'extraction des pigments chlorophylliens ; puis
l'absorbance de l'extrait est mesurée à deux longueurs d'ondes, avant et après acidification
(AMINOT et CHAUSSPIED, 1983).
Appareillage et matériel utilisé
- Une pompe sous vide et un système de filtration ;
- Une centrifugeuse ;
- Un spectrophotomètre ;
- Des filtres Wattman 0.47 µm ;
- Des tubes en verre.
Mode opératoire
La filtration des échantillons (500 ml) est effectuée sur des filtres de type wattman GF/F qui
retient des particules de taille supérieur à 47 µm.
Les filtres sont mis dans des tubes à centrifuger en verre (enveloppés dans une feuille
d’aluminium), puis traités avec 10 ml d’acétone dilué à 90% et déchiqueté. Les tubes sont
placés au réfrigérateur et à l’abri de la lumière pendant 24 h.
La mesure d’absorbance est effectuée avant et après acidification aux longueurs d’onde 665
nm et 750 nm.
2.4.4. Mesure de la DBO
La DBO 5 ou Demande Biologique en Oxygène sur 5 jours, représente la quantité d'oxygène
nécessaire aux micro-organismes pour oxyder (dégrader) l'ensemble de la matière organique
d'un échantillon d'eau maintenu à 20° C, à l'obscurité, pendant 5 jours (RODIER, 2005).
Elle représente la quantité d’oxygène nécessaire aux micro-organismes pour oxyder la matière
organique biodégradable présente dans l’eau. Le résultat est exprimé en mg/l d’oxygène
consommé durant cette période. Elle fournit donc une indication importante permettant de
juger de la qualité d’une eau et de son degré de pollution (RODIER, 1996).
C'est une méthode manométrique avec des manomètres de marques OxiTop à affichage
numérique qui se fixe directement sur le flacon de DBO.
Principe
La consommation de l’oxygène par les bactéries présentes dans l’eau provoque une
diminution de la pression dans le récipient hermétique et induit une variation de la hauteur du
mercure dans le manomètre. Le CO 2 produit est absorbé par une base forte (NaOH).
Matériels et méthodes
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2.4.3. Dosage de la chlorophylle
La présence de phytoplancton dans l’eau est estimée par la mesure de la chlorophylle
(RODIER et al., 1997).
Principe de la méthode (Méthode Spectrophotométrique)
Après filtration d'un certain volume d'eau de mer pour concentrer le matériel particulaire, le
filtre est immergé dans un solvant qui assure l'extraction des pigments chlorophylliens ; puis
l'absorbance de l'extrait est mesurée à deux longueurs d'ondes, avant et après acidification
(AMINOT et CHAUSSPIED, 1983).
Appareillage et matériel utilisé
- Une pompe sous vide et un système de filtration ;
- Une centrifugeuse ;
- Un spectrophotomètre ;
- Des filtres Wattman 0.47 µm ;
- Des tubes en verre.
Mode opératoire
La filtration des échantillons (500 ml) est effectuée sur des filtres de type wattman GF/F qui
retient des particules de taille supérieur à 47 µm.
Les filtres sont mis dans des tubes à centrifuger en verre (enveloppés dans une feuille
d’aluminium), puis traités avec 10 ml d’acétone dilué à 90% et déchiqueté. Les tubes sont
placés au réfrigérateur et à l’abri de la lumière pendant 24 h.
La mesure d’absorbance est effectuée avant et après acidification aux longueurs d’onde 665
nm et 750 nm.
2.4.4. Mesure de la DBO
La DBO 5 ou Demande Biologique en Oxygène sur 5 jours, représente la quantité d'oxygène
nécessaire aux micro-organismes pour oxyder (dégrader) l'ensemble de la matière organique
d'un échantillon d'eau maintenu à 20° C, à l'obscurité, pendant 5 jours (RODIER, 2005).
Elle représente la quantité d’oxygène nécessaire aux micro-organismes pour oxyder la matière
organique biodégradable présente dans l’eau. Le résultat est exprimé en mg/l d’oxygène
consommé durant cette période. Elle fournit donc une indication importante permettant de
juger de la qualité d’une eau et de son degré de pollution (RODIER, 1996).
C'est une méthode manométrique avec des manomètres de marques OxiTop à affichage
numérique qui se fixe directement sur le flacon de DBO.
Principe
La consommation de l’oxygène par les bactéries présentes dans l’eau provoque une
diminution de la pression dans le récipient hermétique et induit une variation de la hauteur du
mercure dans le manomètre. Le CO 2 produit est absorbé par une base forte (NaOH).