Chapitre II
MATÉRIELS ET MÉTHODES
42
Figure (II.10) : Les différentes étapes de l'extraction de l'ADN à partir les organes de la daurade
(modifier par Mme AMAR, 2007).
3.4.2. Contrôle de l’ADN extrait (L’électrophorèse)
Nous avons utilisé l’électrophorèse pour estimer la qualité et la quantité de l’ADN
extrait.
L’électrophorèse
C’est une technique basée sur la séparation des molécules de charges électriques
différentes.
Préparation du gel d’agarose :
o Mélanger tampon TBE10X (890Mm Tris, 890Mm acide borique, 2.5Mm EDTA-,
pH=8.3) et de l’agarose à raison de 0,8 g d'agarose pour 100 ml de tampon (la
proportion d’agarose dépend de la taille des molécules d’ADN à séparer).
o Puis à l’aide d’une plaque chauffante, faire fondre l'agarose avec une agitation de
temps à autre pour homogénéiser le mélange. Laisser refroidir jusqu'à ce qu’il devienne
possible de saisir le flacon à main nue (environ 60 °C).
MATÉRIELS ET MÉTHODES
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Figure (II.10) : Les différentes étapes de l'extraction de l'ADN à partir les organes de la daurade
(modifier par Mme AMAR, 2007).
3.4.2. Contrôle de l’ADN extrait (L’électrophorèse)
Nous avons utilisé l’électrophorèse pour estimer la qualité et la quantité de l’ADN
extrait.
L’électrophorèse
C’est une technique basée sur la séparation des molécules de charges électriques
différentes.
Préparation du gel d’agarose :
o Mélanger tampon TBE10X (890Mm Tris, 890Mm acide borique, 2.5Mm EDTA-,
pH=8.3) et de l’agarose à raison de 0,8 g d'agarose pour 100 ml de tampon (la
proportion d’agarose dépend de la taille des molécules d’ADN à séparer).
o Puis à l’aide d’une plaque chauffante, faire fondre l'agarose avec une agitation de
temps à autre pour homogénéiser le mélange. Laisser refroidir jusqu'à ce qu’il devienne
possible de saisir le flacon à main nue (environ 60 °C).