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Annexe I
1. Technique de préparation d’un milieu de culture
La préparation classique d’un milieu de culture passe par les étapes suivantes :
 La culture et l’interprétation de la formule de préparation.
 Rassembler les différents constituants.
 La pesée.
 Dissolution avec ajustement du volume exact.
 Ajustement du pH.
 La répartition.
La stérilisation du milieu de culture se fait à l’autoclave 120°C pendant 15 min,
2. Composition des milieux de cultures :
Formules indiquées en gramme par litre d’eau distillée.
Eau peptonée tamponnée (E.P.T)
Formule :
 Mélange de peptones : 10,0
 Chlorure de sodium : 5,0
 Di-sodium hydrogénophosphate : 3,5
 Dihydrogénophosphate de patassium : 1,5
pH final=7,2 à 25°C
Autoclaver 20 min à 120°C
Eau peptonée exempte d’indole (E.P.I)
Formule :
 Peptone exempte d’indole : 15
pH= 7,2 à 25°C
Répartir en tubes à essais (9ml) et autoclaver 15min à 120°C.
Bouillon lactosé
Formule :
 Hydrolysat pancréatique de gélatine : 5,0
 Extrait de viande : 3,0
 Lactose : 5,0