Deuxième chapitre : Matériel et méthodes
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Recherche de l’oxydase :
 Déposer sur une lame porte objet propre, un disque « oxydase » et l’imbiber avec une
goutte d’eau distillée ou d’eau physiologique stérile. Prélever une partie de la colonie à
étudier à l’aide d’une pipette pasteur boutonnée stérile et l’étaler sur le disque.
 Une coloration violet foncé apparait immédiatement sur le disque ou en quelques
secondes puis vire au noir indique que la bactérie produit une oxydase (DELARRAS,
2007).
Recherche de la catalase :
 Principe :
La catalase est une enzyme qui catalyse la dégradation du peroxyde d’hydrogène
(H2O2) suivant la réaction suivante :
Le test consiste à mettre des bactéries en quantité suffisante en contact de peroxyde
d’hydrogène (H2O2). Si elles possèdent la catalase, elles dégradent le peroxyde
d’hydrogène en eau et dioxygène visible par la formation de bulles.
 Technique :
 Déposer sur une lame propre, séchée, une goutte d’eau oxygénée,
 Prélever une colonie bactérienne bien isolée à l’aide d’une pipette pasteur,
 Dissocier la colonie dans la goutte.
 L’observation se fait immédiatement :
 S’il y a un dégagement gazeux : catalase +.
 Pas de réaction : catalase -.
2H2O2
O2 + 2H2O