Deuxième chapitre : Matériel et méthodes
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4. Dénombrement de la flore mésophile aérobie total à 30°C
Il a été réalisé suivant la méthode horizontale de la norme AFNOR (NF ISO 4833,
MAI 2003).
a. Mode opératoire : on prélève 1 ml de chaque dilution qu’on introduit
aseptiquement dans des boites de pétri. On y ajoute 15 ml de milieu PCA (Plate
Count Agar) en surfusion. Le mélange est homogénéisé par des mouvements
circulaires des boites (mouvement de 8), on ajoute 4ml de PCA ou gélose blanche,
les boîtes sont ensuite incubées à 30°C. le comptage se fait après 72h
d’incubation.
b. Lecture :
On dénombre les colonies dans les boites qui contiennent au moins 15 et moins de
300 colonies. La figure N°07 ci-dessous décrit le protocole pour le dénombrement
de la FMAT.
1ml
1ml
Dilutions
décimales
1ml
1ml
PCA en double couche
PCA
PCA
Incubation à l’étuve à 30°C pendant 48 à 72h
Lecture :
dénombrement
des colonies
blanchâtres
Figure 07 : Dénombrement de la FMAT à 30°C (Norme ISO 4833 ; mai 2003).
9ml d’EPT
10
-2
10
-3
Solution mère (SM) 10
-1
Ensemencement en
profondeur avec du
PCA en double
couche
1ml